第二章+热灭活微生态制剂-课件.pptVIP

第二章 热灭活乳酸菌微生态制剂——全新的益生素概念 主要内容 一、传统益生素概念 二、热灭活的乳酸菌 三、国外产品临床试验结果 四、我们的研究 五、下一步研究 1、益生菌和益生素(Probiotic) 益生菌是指能够在人或动物体内存活，对宿主的生命健康有益的一类微生物。 它是人或动物胃肠道共生微生物的培养物或其发酵产品，故又称活菌制剂或微生态制剂。 由活体微生物及其代谢产物制成的有益微生物活性制剂称作益生素。（袁铁铮和姚斌，2004，中国生物工程杂志） 乳杆菌(Lactobacillus plantarum/acidophilus) 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 粪链球菌(Streptococcus faecalis) 酵母菌(Yeast) 酵母菌(yeast) 益生素的作用机理-2 前因： 益生菌进入畜禽肠道后，在复杂的微生态环境中与近400种正常菌会合，显现出栖生、偏生、共生、竞争或吞噬等复杂关系，从而对宿主产生营养、免疫、刺激生长及生物拮抗等生物作用，以保持胃肠道微生态环境的平衡，提高动物生长性能，防病治病，最终取得良好的保健效果或经济效益。 益生素的饲喂作用机理概括起来有三大方面，即保健、促生长和防治疾病。 益生素作用机理-3 保健： 作用机制理论基础是微生态平衡论、失调论。从微生态学角度讲，人或畜禽肠胃道疾病是由于体内菌群平衡失调所引起，使用益生素后体内有益菌群逐渐增加，并消耗氧气而造成厌氧环境，从而抑制致病性需氧菌生长。有益菌产生的有机酸降低pH值，产生溶菌酶、过氧化氢等物质抑制有害菌及毒素的产生，恢复或维持正常菌群原有的平衡状态，达到保健的目的。 促进生长： 其作用机制理论基础是微生物营养论。即产生多种消化酶，提高饲料转化率和促进肠内营养物质的消化、吸收；降低大肠菌群数，减少营养物质内耗。产生的代谢产物可以抑制肠内胺和氨的产生；产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶，有利于物质的分解；合成B族维生素，氨基酸、未明促生长因子等营养物质。 防治疾病： 竞争性排斥作用（competitive exclusion, CE）;免疫刺激作用；以IgA为主。减少胺或氨的产生；减少致癌致变物质的产生；代谢产物对致病菌的直接杀灭作用。 4、存在的缺点和问题 1、受环境条件(温度、水分、酸碱度等)的影响，其活菌制剂在生产、运输中易失活，从而降低使用效果； 2、饲料加工的高温过程使大量的活菌致死，导致有效成份损失； 3、饲料中添加的或在治疗过程使用的抗生素和化学合成抗菌剂，对益生菌同样具有杀灭或抑制作用； 4、进入消化道后不能有效抵抗盐酸、胆盐，来不及到达肠道或无法长时间定植肠道发挥其功效；二度感染的可能。 5、对动物肠道疾病的治疗效果仍不尽人意。 4、克服缺点的技术与方法 1、选育优良菌种或利用芽孢。耐高温、耐酸、耐胆盐或耐氧等。甚至有的公司在宣传其具有耐药性的乳酸菌。 2、将活菌制成微胶囊。保护作用，隔离高温、氧气和胃酸。很有效，但成本高。 3、饲料高温加工后再喷涂。避免高温失活。 二、热灭活的乳酸菌制剂 概念： 有人尝试将乳酸菌培养好之后，将细胞热灭活(heat-killed)后，仍保持细胞的完整性（或碎片）作为益生素使用，结果发现同样具有活菌的效果。后来我们将乳酸菌发酵代谢产物也加入其中，预防和治疗人和动物腹泻效果更加理想。 1、发展历史 法国Laboratoire du Lactéol公司是这方面的先驱。 医学博士皮埃尔、布卡德(Pierre Boucard)先生于一九零七年创建。并率先研究和开发出热灭活的乳酸菌细胞制成的微生态制剂。用于预防及治疗人或畜禽的腹泻，包括抗生素相关性、细菌性和病毒性腹泻。目前作为人或动物用药在全球取得了空前成功。 1998年我们首次在国内做了介绍与报道，并于当年展开研究。 2、热灭活乳酸菌制剂的优点 1、收集纯细胞，可制成高浓度制剂，如100-1000亿/克甚至更高； 2、灭活的细胞不再担心环境条件的影响； 3、不再担心二度感染； 4、同微胶囊比，生产成本大大降低。 5、同抗生素一起使用有协同作用； 6、不用选育耐高温、耐抗生素菌种。 7、避免了噬菌体的爆发。 3、作用特点 1、细胞浓度高，见效快； 2、耐高温、耐抗生素、耐胃酸和胆盐，效果稳定。 3、粘附到肠细胞皮面，竞争性排斥有害菌； 4、选择性抑杀有害菌，而对乳酸菌没有作用。可作为治疗药物； 5、细胞壁多糖的免疫刺激作用； 6、吸附生物毒素，如黄曲霉毒素； 7、预防与治疗的作用。 4、作用机理（竞争性排斥） 灭活的乳酸菌细胞粘附到肠细胞表面形成具保护作用的生物膜，竞争性排斥有害菌的粘附与侵入。 Adhesion of Strain LB onto HeLa cellsinducin