细胞生物学-3细胞生物学研究方法-02-课件.pptVIP

杰夫·利希曼(Jeff Lichtman)之手，展现了大脑内的连接，图片中美丽的“彩虹”就是神经系统网络。 脑内连接 这两只荧光猪诞生于中国黑龙江省哈尔滨东北农业大学的实验室。它们的发光本领并不是转基因技术的直接产物，而是从其经过基因改造的母亲那里遗传而来。 两只荧光猪 发红光的猫 左侧的猫由韩国研究人员2007年晚些时候打造，能够在紫外线下发出红光。某些情况下，这些荧光蛋白基因可用作一种分子开关，触发其它细胞活动 GFP宾尼兔 荧光兔“阿尔巴”(Alba)。阿尔巴是在转基因技术帮助下拥有这种荧光基因的。《GFP宾尼兔》的问世在世界上引发不小争议。 蝌蚪也发光 荧光鱼 在约克镇科技公司将荧光鱼引入市场后不久，荧光蛋白便迅速在商业上得到应用。 绿色荧光蛋白质可以帮助科学家了解细胞机制如何工作。利用转基因技术，所有细胞和动物都可以产生荧光蛋白质。 康涅狄格学院化学家、《发光基因》作者马克·齐默(Mark Zimmer)将绿色荧光蛋白质称之为“21世纪的显微镜”。通过让基因携带绿色荧光蛋白质——与瘤转移或大脑功能有关的基因——科学家只需通过寻找荧光便可知道基因何时以及为什么“开启”。 细胞结构、蛋白质（如受体、抗原、抗体、酶、细胞 骨架蛋白等基因表达产物）、DNA、RNA等 细胞膜流动性（荧光光漂白恢复技术） 细胞内氧自由基活性 细胞内钙离子浓度变化 膜电位 共聚焦扫描显微镜在生命科学研究中的应用 Drosophila embryo stained with a fluorescent probe for actin filaments Conventional Confocal GFP tagging: Arabidopsis leaves SEM Confocal:talin-GFP 习题 为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜？ 比较放大率与分辨率的含义。 试比较电子显微镜与光学显微镜的区别。 判断题1．细胞质是细胞内除细胞核以外的原生质。2．细胞是生命活动的基本功能单位, 也是生命的惟一表现形式。 3. 生命具有自我复制、自我装配和自我调控的基本特征， 并反映在细胞的各级结构水平上。4. 原生质是细胞内除了细胞核以外的生活物质。简答细菌细胞膜有何特点？ * Fruit fly: generation time 2weeks;produce many offspring; embryo develop outside C elegans: a millimeter long, transparent body only a few cell types, from zygote to mature adult only in 3.5days. Zebrafish:2-4cm,embryos develop outside,generation time2-4months, 24hr form most of the tissues and organs, 2days hatches out of the egg. But it’s unclear about its genetic map. 来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需 的物质(如供能系统和酶反应体系等)组成的体系即为非细胞体系 近年来．非细胞体系在研究DNA复制、RNA转录、蛋白质合成、高尔基体的膜泡运输机制以反细胞核装配(包括染色质装配、核膜装配及核骨架的装配)等。 概念 流式细胞术（Flow Cytometry，FCM） 利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。 流式细胞仪（Flow Cytometer) 集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的一种新型高科技仪器。 原理： 将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。 Fluorescence Activated Cell Sorting 488 nm laser + - Charged Plates Single cells sorted into test tubes FALS Sensor Fluorescence detector 细胞分选 细胞标记 染色体分选 染色体标记 FACSAria 科研型 特点： 分辨率高 选配多种波长和类型激光