细胞整理—综合选读.doc

细胞生物学：是研究细胞基本生命活动规律的科学，它从不同层次（显微、亚显微与分子水平）上研究细胞结构与功能，细胞增殖、分化、衰老与凋亡，细胞信号转导，细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等。 细胞学说：①一切动物和植物都是由细胞构成的。②细胞是构成有机体的基本结构和功能单位。③任何一个细胞都是从已存在的细胞分裂而来。 细胞的基本共性：①具有生物膜结构。②具有DNA和RNA两种核酸。③具有蛋白质合成的机器——核糖体。④以一分为二的方式进行分裂。 细胞的3大基本结构和功能体系：①以脂质和蛋白质成分为基础的生物膜系统，其主要功能是使细胞功能区域化。②以核酸和蛋白质为主要成分的细胞核系统，其主要功能是控制遗传信息的表达。③由特异的蛋白质分子构成的细胞骨架系统，其主要功能是支持细胞的有形结构，为细胞提供运输轨道。 原核细胞与真核细胞的比较：根本区别：①真核细胞出现了核被膜，从而把胞质与核质分开，使遗传物质及其复制与转录过程局限在一个独立区域与微环境中。而蛋白质合成、能量代谢与供应，以及其他一系列代谢过程均在细胞质内进行。原核细胞的DNA分子主要盘绕在核区或均匀分布在细胞质中，没有核膜包围。②真核细胞细胞质内以膜系统为基础进一步分化出结构与功能更专一的各种细胞器，如内质网、高尔基体、溶酶体、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等。而原核细胞的细胞膜通过内陷折叠，与各种酶或色素结合，以完成多种功能，故原核细胞的细胞膜具有多功能性。③真核细胞具有精细的网络状的骨架系统，包括微管、微丝和中间纤维。④遗传信息量的扩增、遗传装置和基因表达的复杂化是真核细胞不同于原核细胞的重要标志之一。由原核细胞的单倍性变为多倍性，DNA由游离的裸露的环状分子转变为与多种组蛋白结合的线状分子，以核小体为基本单位螺旋盘绕形成高度复杂的染色质与染色体。原核细胞的转录与翻译可同时进行，而真核细胞基因表达严格划分为细胞核内转录与细胞质翻译两个过程，而且基因表达的调节更具复杂性和多层次性。真核细胞的细胞分裂出现纺锤丝而称为有丝分裂。原核细胞的二分裂放弃称为直接分裂。 古核细胞（古细菌）：是一些生长在极端特殊环境中的“细菌”，其形态结构、遗传装置及其基本生命活动方式虽与原核细胞相似，但16S rRNA序列同源性和其他一些基本分子生物学特点又与真核接近。 非细胞形态的生命体：（1）病毒：是由核酸分子与蛋白质构成的核酸-蛋白质复合体。作为非细胞形态的生命体，是最小最简单的有机体。（2）类病毒：仅由感染性的RNA构成，是类似病毒的更简单的生命体。（3）朊病毒：仅由感染性的蛋白质构成，如疯牛病朊病毒。 免疫荧光标记技术：通过荧光标记的抗体与细胞内特异成分结合来显示生物大分子在细胞中的分布，该法常用于研究细胞内蛋白质的特异定位。 绿色荧光蛋白（GFP）的应用：①与某种蛋白基因融合，在表达这种融合蛋白的细胞中，便可直接在活体状态下观察到该蛋白在活细胞内的动态变化。②应用于荧光漂白恢复技术，使用与蛋白质或脂质偶联的亲脂性或亲水性的荧光分子，如荧光素、绿色荧光蛋白等，检测活体细胞表面或细胞内部的分子运动以及在各种结构上分子动态变化率的大小。 激光扫描共聚焦显微技术：它是在荧光显微镜成像的基础上加装了激光扫描装置，利用共聚焦光路和激光扫描技术获取生物样品不同层面的图像，再通过计算机合成三维重构的影像。特点：激光扫描共聚焦显微镜观察的焦平面内结构要比传统的显微镜清晰，比普通荧光显微镜的分辨率提高1.4～1.7倍。优点：①排除了焦平面以外光的干扰，增强了图像反差，并提高了分辨率；②可重构样品的三维结构，③可同时对用两种或三种不同荧光染料分别标记的细胞的不同细胞结构进行观察④除了可对固定标本的细胞进行观察，还可以获得活细胞内的结构信息和数量化信息。 荧光漂白恢复技术：利用高能量激光束的照射使特定区域的荧光发生不可逆的淬灭（漂白），然后位于非漂白区的荧光标记分子由于能够在细胞膜或细胞质中运动，而到达光漂白区，完成荧光的复原过程。 荧光共振能量转移技术：当一个荧光分子的荧光光谱与另一个荧光分子的激发光谱有一定的重叠是，供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光，产生的荧光能量由供体向受体转移，这时可观察到受体基团发射的荧光。应用：荧光共振转移技术作为一种高效的光学“分子尺”，在生物大分子相互作用、免疫分析、核酸检测等方面有广泛的应用。 负染色技术：由于染液中某些重金属盐等电子密度高的物质的存在，导致图像背景是黑暗的，而样品电子密度低。二者之间的反差正好相反，故称为负染色。 冷冻蚀刻技术：是一种透射电镜样品制备技术。冷冻断裂是在一种极低的温度下将生物样品断裂，暴露出生物材料膜脂的镶嵌蛋白颗粒，然后在断裂面上进行倾斜喷涂，形成对立与凸凹的电子反差，制成一层复型膜然后在透射电镜下观察。冷冻蚀刻：是在冷冻断裂的基础上加以改进，