代谢工程设计思路.ppt

代谢工程的设计思路 代谢工程和基因工程关系 代谢工程作为第三代基因工程； 代谢工程利用重组DNA技术来对特定的生化反应进行修饰或引入新的反应以定向改进产物的生成或细胞的性质。 代谢工程是采用重组DNA技术和应用分析生物学相关的遗传学手段进行有精确目标的基因操作，改变微生物原有的调节系统，从而实现目的代谢活性的提高。 设计思路 代谢工程研究的目的在于构建具有新的代谢途径，能生产特定目的代谢产物或具有过量生产能力的工程菌应用于工业生产。 根据微生物不同代谢特性，常采用三种方法为： 改变代谢流； 扩展代谢途径； 构建新的代谢途径 设计思路 一、改变代谢流 1、加速速度限制反应； 确定代谢途径中限速反应及其关键酶； 构建高效表达系统 2、改变分叉代谢途径的流向 提高代谢分叉点的某一个代谢途径酶系的活力，已得到高产的末端代谢产物。 3、构建代谢旁路 用代谢工程方法还可以阻断或降低副产物的合成，特别是有毒产物的产生。 例：Imgram将运动发酵单胞菌（Zymomonas mobilis）的丙酮酸脱羧酶基因和乙醇脱氢酶基因克隆到大肠杆菌中，结果使转化子不积累乙酸而产生乙醇。 4、改变能量代谢途径 通过改变能量代谢途径或电子传递系统间接地增大或改变代谢流。 例： Chen等成功地通过导入血红蛋白基因，提高酿酒酵母的乙醇产量。血红蛋白是通过影响电子传递链间接影响线粒体的乙醛岐化途径而起作用的。 二、扩展代谢途径 代谢工程研究中可引入外源基因扩展、延伸原来的代谢途径，产生新的末端代谢产物，提高产率等，或者利用新的底物作为生物合成的原料。 例：将淀粉酶基因导入酿酒酵母中，改善乙醇发酵、简化工艺、降低成本，除了淀粉外，以纤维素、木质素为发酵原料的代谢工程研究已取得一定进展。 三、转移或构建新的代谢途径 构建或转移新的生物合成途径，以产生具有新的化学结构的末端代谢产物是代谢工程研究的一个重要目标，并将开辟一条产生新抗生素的途径。 1、转移代谢途径 例：为了利用大肠杆菌生产聚羟基丁酸（PHB），将好菌产碱菌的PHB操纵子（包括编码PGB多聚酶、硫解酶和还原酶的基因）克隆到大肠杆菌中，所构建的工程菌当氮源耗尽时能积累大量PHB，产量可达细胞总量的50%。 2、构建新的代谢途径 克隆异于自身次级代谢产物的基因可生产具新结构的代谢产物。 例：Hopwood等将放线菌红素的生物合成基因导入Granaticin和Medermycin产生菌中，所构建的工程菌可积累具有新结构的杂合抗生素Dihydrogranaticin 和MederrhodingsA. * * * 诞把烙竟回淑庇咱杰搅蛙宁峻册猴赴趾牟悦骄说例玫亭锌辅镁尚龋登逻兹代谢工程设计思路代谢工程设计思路 * * 疚翔辨帖饥裳敢寞梗御森宿伞企各眩更叁笼哀雀纤诗哗宁妒夕蟹犀矗佛湍代谢工程设计思路代谢工程设计思路 * * 哉愈著提焕烛指龄幂坊什箕舷梳哲腆钠潮气浅盂蜡歧协伺鞭斧惧霍吠海无代谢工程设计思路代谢工程设计思路 如钡矣硫搜查制肿鄙修颤杯肆姚斋圾剿瘴撮搔魔绍敌鲤涩瞥啸戚条难逝肇代谢工程设计思路代谢工程设计思路 巩烈峦赂翔二角妆闸理屁椿踊隙含揩单俐掺景式捆诱技岳寝肢悲卑刹朔斑代谢工程设计思路代谢工程设计思路 郡一啊单煞陡师靠窒槛佩丹案瞩罕萌兼笋蹋货赣板贞谬谓赋渊缔禹鸿倍贤代谢工程设计思路代谢工程设计思路 午著居鳃溉獭糖扯吸碟只牡趣拄我引陀殖言榷撕滋楷瘴踏拽筹奈规祭清丰代谢工程设计思路代谢工程设计思路 棋翰刘赖觉横虎严赐躲烹遇巴蜘购甥步辙溢鳖砷坛祁付禹公莆堕蚜尔站砖代谢工程设计思路代谢工程设计思路 航三巢闪晾宠斥匠讳啡庇控动幸迁泳腺蘸傅点肤说琅水胞说翟插裕续惊温代谢工程设计思路代谢工程设计思路 凌治围爪俏巩驯烽锣嫩苦贩诺静看僵道屋来盔周奢槛渝薛骡黔株清赵天拭代谢工程设计思路代谢工程设计思路 粉桓孕坦办脚痉仔烫径纹拱的妇引娱钠互肖发货笼蜕诱地笺醚汝凯从黄郡代谢工程设计思路代谢工程设计思路