冻存对骨髓基质细胞生物学特性影响的实验研究.pdfVIP

冻存对骨衄基质细胞生物学特性影响的实验研究 PDGFPlateletderived factor 血小板衍生生长因子 growth PET Polyethyleneterephthalate 聚对苯二甲酸乙二醇酯 PGA Polyglycolide 聚羟基乙酸 PLA Polylactide 聚乳酸 PLGA 聚乳酸羟基乙酸 Polylactide·CO-glycolide PRP Platelet—rich 富血小板血浆 plasma e．PrrFE 聚四氟乙烯 e-Polytetrafluoroethylene activatorof RANKLReceptor NF-kappaBligand KB受体活化因子配基 RP Rapid 快速模板 prototyping TCP Tricalcium 磷酸三钙 phosphate TGF factor 转化生长因子 Transforminggrowth VEGFVascular endothelialfactor 血管内皮细胞生长因子 growth 3 冻存对骨倘基质细胞生物学特性影响的实验研究 冻存对骨髓基质细胞生物学特性影响的实验研究 中 文 摘 要 传统的牙周病治疗方法常因牙周局部缺少足量的内源性干细胞而疗效有限。 stromat marrow 骨髓基质细胞(bone cells，BMSCs)是组织工程技术重要的种子细 胞，与支架材料、生长因子联合应用可以有效修复组织缺损。同一时期内要获得 同一标准的大量BMSCs，需经过繁琐的培养过程，在一定程度上造成人力、物 力、时间的浪费，所以有必要寻找一个方便、简洁、安全、有效的保存细胞生物 学特性的方法。 目的：研究Bea百e犬BMSCs体外连续培养的增殖分化情况，寻找具有最佳 增殖分化能力且性能稳定的细胞代次：探讨不同的冻存方法对BMSCs生物学特 性的影响，寻找适宜的犬BMSCs冻存的方法；观察冻存前后BMSCs体内形成 牙周支持组织能力的变化。 方法：本研究分为三部分 第一部分体外BMSCs性能稳定性研究 从Bea掣e犬股骨抽取骨髓，培养，传代，每日用倒置显微镜观察细胞生长 情况及形态变化：选择生长良好的第4、5、6、7代BMSCs，显微镜下观察计数 细胞贴壁情况；MTr法测定细胞的增殖活性，描绘细胞生长曲线图：检测第5、 10、15天时碱性磷酸酶(alkaline 结节状聚集时行VonKossa染色观察其体外矿化情况。 第二部分不同冻存方法对BMSCs体外生物学活性的影响 从Bea出e犬股骨抽取骨髓，培养，传代，至第4代时将其以不同细胞浓度 15％)、不同降温方式以及消化或原位等方法进行冻存，一个月后细胞复苏传至 第7