基因表达谱芯片筛查子宫内膜癌相关基因.pdfVIP

纂因表达谱芯片筛查于宫内膜痛相关基I丑 技术一生物芯片中的一种，该技术具有高信息量、准确度高、自动化程度高等特点， 能对子宫内膜癌基因表达谱网络全面研究。 本课题采用的人类表达谱芯片CSC—GE一80，含8064条基因，涵盖了免疫、细 胞周期、细胞凋亡、细胞外基质、原癌基因／抑癌基因、代谢、运输、细胞信号传 导、DNA损伤修复等基因，可用于各种疾病或细胞模型中基因特异性表达变化的高 能量筛选。本课题用此芯片对ll例子宫内膜癌及正常增殖期子宫内膜癌组织的基 因表达情况进行比较，筛查子宫内膜癌的相关基因，对子宫内膜癌的发病机制及 其治疗提供有益的线索。 研究目的 1、应用基因芯片初步分析子宫内膜癌基因表达谱的变化，探讨子宫内膜癌发乍发 展的分子机理，筛选子宫内膜癌致病相关基因。 2、重点探讨细胞外基质调控、细胞因子相关基因的异常与临床意义，为子宫内膜 癌的诊断、治疗和预后提供理论依据。 3、筛选出在子宫内膜癌中特异表达且变化显著的摹因，在今后研究子宫内膜癌的 标志物或研制子宫内膜癌功能j占片提供依据。 材料与方法 本课题收集手术病理证实为子宫内膜癌的患者共11例，每例患者均取手术切 除的子宫内膜癌组织；并收集子宫肌瘤患者3例，每例患者在全子宫切除术后取 正常的子宫内膜组织，病理证实均为增殖期子宫内膜。先用Trizo]提取组织总 RNA，然后进行RNA的纯化，用琼脂糖凝胶电泳和紫外光光度计检测RNA质量和样 品浓度及总量；对实验组(肿瘤组)混合样品和正常对照组混合样品进行配对， 其中肿瘤组混合样品总RNA采用反转录标记Cy5荧光分子，对照组混合样品采用 反转录标记Cy3荧光分子，与人类基因表达谱j出片杂交；完成两张芯片(编号分 Il 。中山大学|；『J属第三医院妇产科2006午硕上学位渔文 —— 苎里墨垄堕蔓丛堕垄王宴堕堕堕塑薹苎望 Pharmacia Biotech，Ltd)扫描图像；用软件ArrayVision(ImagingResearch，Ltd．)分析 芯片实验数据。 结果 子宫内膜癌表达谱的初步分析：在2张含8064个基因的基因芯片中筛选出11 例标本共差异基因274条，其中上调92条，下调182条。这些差异基因涉及细胞 外基质调节基因(如胶原酶、胶原等)、细胞因子(如三叶因子、铁传递蛋白等)、 促癌基因／抑癌基因、细胞周期、细胞凋亡、金属硫蛋白类等。 结论 l、子宫内膜癌表达谱的异常可能涉及到细胞外基质成分降解、细胞生长失控、细 胞信号紊乱等多方面的改变。 2、子宫内膜癌细胞外基质成分相关基因(如MMP、SPPl、胶原等)均在转录水平 发生了不同程度的改变。其中胶原酶的激活及胶原的抑制为肿瘤的侵袭与转移 创造条件。 3、子宫内膜癌中可见多数的生长因子(如IGF)下调表达，但某些与性激素调节 密切相关的细胞因子如铁传递蛋白、24p3等呈现出显著的上调表达。提示子宫 内膜癌与性激素调节关系密切的生物学特性。 关键词 子宫内膜癌，芯片，基因表达谱，细胞外基质，细胞因子 III 中山火学附属第三医院妇产科2006年碗上学位论文 基用表达谱芯片筛查子宫内膜癌相关拱吲 on Preliminary studygeneexpression profile ofendometrial adenocarcinoma Major：Gynecology Name：ShufangHuang XiaomaoLi Supervisor：Professor ABSTRACT Background Endometrialcarci