基质金属蛋白酶9（mmp9）与宫颈成熟扩张关系的研究.pdfVIP

4．在室温下离心15分钟取上清液待用。 5．预实验分别将上清液稀释2倍、50倍、100倍确定将样本稀 释32倍后待用。 6．加样：用ELISA试剂盒加入标准液，孵育2小时。 7．加酶抗，孵育t小时。 8．显色，孵育30分钟。 9．终止，30分钟内用酶标仪在OD450nm下读数。 四、结果的判定：对所得数据进行单因素方差分析 结 果 一、宫颈扩张不同阶段各组孕妇在年龄、孕龄、胎儿出生体重 方面比较无统计学差异(P0．05)。 二、有宫缩剖宫产组子宫下段组织中MMP一9浓度3．05_4-2． 0．05)。 三、无宫缩剖宫产组子宫下段组织中MMP一9浓度0．76．4-0， =8．24，P0．01)，至第二产程达高峰6。08±2．53 rig／mg(F=30。 ． 78，P0．01)差异有极显著性。 四、进入第一产程随宫口开大MMP一9浓度呈上升趋势，宫 为3．38、1．56、2．02、P0．05)。 讨 论 宫颈主要由结缔组织组成，结缔组织中胶原纤维是其主要成 分，约占70％；妊娠中期以后，胶原纤维束松散、断裂，胶原含量减 ·2- 少，足月时降至非孕时的1／3。对胶原起降解作用的主要是由 MMPs介导，导致富颈成熟、扩张。MMPs主要参与细胞外基质代 谢，可降解细胞外基质中至少一种组成的蛋白酶。MMPs参与许 多生理过程，如胚胎发育、分娩发动、产后子宫缩复、子宫内膜周期 性剥脱及一些病理过程，如类风湿性关节炎、牙周病、肿瘤侵袭等。 胎盘和胎膜中主要的MMPs有1、2、3、9型，宫颈中主要有1、2、3、 抗体后发现，可抑制金属蛋白酶活性的50％以上，这表明在分娩 发动中起主要作用的是MMP一9，宫颈中主要胶原成分为I型和 Ⅲ型胶原，而MMP一9的主要作用为降解完整Ⅳ型胶原和已经部 分降解的l型和Ⅲ型胶原。因此本研究采用酶联免疫分析法分别 测定分娩不同阶段产妇子宫下段组织中MMP一9的变化，来分析 其在产程进展过程中的作用。 Winkler等对子宫下段组织中MMP一9浓度进行研究发现，随 宫口扩张，MMP一9浓度上升，从而提出宫颈的成熟、扩张与MMP 一9浓度升高有关。Frank等对不同孕龄孕妇羊水中MMP一9浓 度进行测定发现，其随孕龄增加而升高，从而认为MMP一9在妊 娠进展、宫颈成熟中起重要作用。本研究结果表明子宫下段组织 中MMP一9浓度有宫缩剖宫产组明显高于无宫缩剖宫产组，说明 MMP一9在分娩过程中的重要作用，子宫下段组织中MMP一9浓 度随着宫颈成熟扩张而显著升高。MMP一9浓度与宫颈扩张程度 呈正相关，这也说明了分娩期MMP一9活性升高，降解其特异底 物成分导致大量胶原组织被分解，表现为宫颈成熟扩张，推动产程 进展，我们的实验也证明了这一点。基质金属蛋白酶在分娩发动 中的主要作用机制目前尚不完全清楚。关于宫颈组织中MMPs活 性升高的原因，Maradny等人认为可能是成熟宫颈组织中性粒细 胞的浸润迅速增加，使MMPs基因表达增高，MMPs的表达被许多 因子诱导，主要是各种细胞因子和生长因子，Junqueira等用电镜 ·3· 观察发现，在宫颈成熟时宫颈中浸润的多形核白细胞(PMN)有脱 粒现象，其周围有胶原溶解现象，因此推断官颈中MMPs可能主要 来源于浸润的PMN。在浸润细胞和胶原降解程度间的正性相关 关系都可作为这些细胞释放蛋白酶的证据。因此我们认为MMP 一9在细胞因子调控下，作为宫颈局部变化的中间环节，促使胶原 分解而致宫颈成熟和扩张。4 ， 结 论 分娩发动后，子宫下段组织中MMP一9浓度明显升高，说明 MMP一9在宫颈成熟、扩张中起重要作用，为分娩发动机制提供了 理论和实验依据。 关键词基质金属蛋白酶一9；子宫下段组织；宫颈成熟；宫颈 扩张；分娩发动