子宫肌瘤组织中胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱmrna表达及意义.pdfVIP

例，简单型或复杂型增生过长3例。收集子宫肌瘤中心部位组织 30例，及其包膜2em外正常子宫肌组织18例作为对照组，所有标 本取材后置Eppendorf管中，贮存在一70。C超低温冰箱待测。 2．实验材料：TRIZol、逆转录试剂盒：大连宝生物(TakaRa公 司产品)提供。 引物：北京奥科生物技术有限公司合成。 3．实验器材：PCR扩增仪：PTC一100TM(美国) 低温台式离心机：JC一480型(德国) 凝胶成像自动分析系统：1DKODAK(日本) 叭Ⅳ一IIl31A型电泳槽(北京) 方法：半定量逆转录聚合酶链反应技术(RT—PCR法) 1．采用异硫氰酸胍一酚一氯仿方法提取组织总RNA 2．RT—eDNA：逆转录合成eDNA 3．PCR扩增 4．eDNA电泳、自动成像分析、检测各扩增带的产物含量 5．观察结果、统计处理 结 果 1．IGF—I在子宫肌瘤组织、正常子宫肌组织中的相对含量分 常子宫肌组织，差异非常显著(P0．001)。而子宫肌瘤组织、正 常子宫肌组织中IGF一Ⅱ的表达经比较差异无显著性(P0．05)， 其相对含量分别为71．61±2．29，70．53±2．78。 2．子宫肌瘤组织IGF—I相对含量在增殖期和分泌期分别是 106．67±3．55，72．88±3．88，增殖期明显高于分泌期，差异非常 显著(P0．001)，而IGF—II相对含量在增殖期、分泌期无显著差 异(Po．05)，分别为71．67±2．33，71．42±2．45。 ．2． 3．肌瘤组织不论在增殖期或分泌期，其IGF—I的相对含量 均高于正常子宫肌组织，而IGF—lI的相对含量差异无显著性。 讨 论 胰岛素样生长因子(IGFs)是由两种相关多肽组成，胰岛素样 生长因子一I(IGF—I)和胰岛素样生长因子一Ⅱ(IGF一Ⅱ)， IGF—I是一种多功能细胞增殖调控因子，与细胞内信号转导有 关，可导致细胞的增殖、分化，已证实其具有促进平滑肌细胞及其 间质细胞有丝分裂的作用，而IGF—II主要调节物质的加工及降 解，与细胞内的信号转导无关。它们与各自受体结合后发挥各自 的生物学效应。1990年Rein等人首先在体外培养的子宫肌细胞 drasekharY在研究中发现：在子宫肌瘤细胞表面含有特异的，高亲 和力的IGF—I结合位点，且IGF—I结合位点增加，而无IGF一Ⅱ 的增加。本实验采用半定量tit—PCR方法检测子宫肌瘤组织与 正常子宫肌组织中IGF—ImRNA，IGF—lImRlNAR的表达水平，结 果表明：子宫肌瘤组织、正常子宫肌组织中均有IGF—I，IGF一Ⅱ 基因表达，IGF—I基因在肌瘤组织的表达水平显著高于正常子 宫肌组织，而IGF—II基因在肌瘤组织和正常子宫肌组织中表达 水平无统计学意义。可以认为：IGF—I对子宫肌瘤的生长、发育 起主要作用。 可以肯定的是子宫肌瘤的发生、发展与女性激素有关，近年来 有文献报道：雌孕激素在子宫肌瘤发生、发展中促细胞增殖、分化 作用是通过一些生长因子介导的。本研究补充了文献资料发现， mRNA表达水平在增殖期明显高于分泌期， 肌瘤组织中IGF—I 说明IGF—I的介导作用与月经周期变化有关，而无论增殖期、分 mRNA表达均高于正常子宫肌组织，而IGF 泌期肌瘤，其IGF—I ·3· 一ⅡmRNA表达水平在增殖期和分泌期元显著性差异，且无论增 mRNA表达与正常子宫肌组织无明 殖期、分泌期肌瘤，其IGF—II 显差异，可以认为雌孕激素对子宫肌细胞和肌瘤细胞的促增殖、分 化作用主要是通过IGF—I介导，并很强地受雌激素影响，孕激素 起协同作用。 本研究发现在子宫肌瘤中存在着IGF—I表达上调，有报导 R)增加，上调的IGF— 在肌瘤组织中IGF—I结合位点(IGF—I