杂种一代梅大与亲本大白肌肉组织间差异表达基因的筛选、鉴定及其初步分析.pdfVIP

杂种一代梅大与亲本大白肌肉组织间差异表达基因的筛选、鉴定及其初均分析 中文摘要 杂种优势的产生与亲本和子代间基因的差异表达密切相关。本研究以同日龄大 白猪和梅大猪的背最长肌为实验材料，采用抑制消减杂交技术，构建了猪杂种一代 与亲本肌肉组织间正反向消减eDNA文库，并对文库进行了筛选和鉴定，获得了一 部分差异表达片段。为进一步分离、鉴定与杂种优势相关的基因、从基因表达水平 上深入探讨杂种优势的遗传机理奠定基础。获得的主要结果如下： (1)以管家基因13．肌动蛋白(B．actin)为消减指标检测两个文库的消减效率， 较好，可做后续研究。 随机挑取白色重组体，获得了包含近1500个克隆的质粒文库。 (3)PCR检测质粒文库中插入片段的有无和大小，只选取电泳检测扩增产物条带 (4)从梅大消减文库中随机挑选200个克隆做斑点杂交，检测到39个差异表达 片段；从大白消减文库中随机挑选150个克隆做斑点杂交，检测到21个差异表达片 段。 155、 除去冗余序列，发现他们共代表6个不同的基因，分别为人剪接体蛋白SAP 猪3．磷酸甘油醛脱氨酶(