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高脂血症对小鼠睾丸超微结构的影响 前 言 随着环境及生活习惯的改变,男性不育症的发病率正逐年上升,而且病因复杂。 高胆固醇血症会影响睾丸功能,睾丸内精子细胞数量减少; 本实验通过高脂饲料喂养apolipoprotein E(Apo E) 基因敲除小鼠,观察其睾丸超微结构的变化特点,为探讨高脂血症对男性生殖功能的影响提供形态学依据。 1.血脂: 与正常组比较,高脂血症组血脂明显升高。 * * 迄今,60%~75%的患者原因不明。 高脂血症很可能是男性不育症的病因之一 。 用高脂高胆固醇喂养的雄性小鼠,使雌性小鼠受孕的能力下降,胚胎植入和生育率也有降低。 目 的 材料与方法 1.动物分组(12只C57BL/6J雄性小鼠 ) 对照组:6只野生型小鼠 实验组:6只Apo E基因敲除小鼠 2.高脂血症模型的建立 实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料(胆固醇0.5%,猪油10%,蛋黄粉10%,维持料59.5%,蔗糖20%),共12周; 对照组小鼠喂饲普通饲料,喂养12周。 3.透射电镜标本制备 饲养12周后,将小鼠腹腔打开,取出睾丸组织,用双面刀片把样品切割成1mm3小块,置于4℃的2.5%戊二醛溶液中固定过夜,常规冲洗后以l%锇酸后固定。在冲洗后用50%、70%、90%和100%乙醇依次脱水,环氧树脂包埋,超薄切片,最后用醋酸铀及柠檬酸铅双重染色,在日产JEM-1230型透射电镜下,观察小鼠睾丸组织的超微结构变化特点,并摄片。 结 果 0.54±0.03 12.28±3.59* 2.39±0.15 34.86±1.30* 对照组 实验组 LDD-C CHO 组 别 表1 57BL/6J小鼠血清中胆固醇和低密度脂蛋白浓度 (??±s, mmol/L) 与正常组比较:*p<0.05 2.1生精细胞 图1 对照组生精细胞核(★)、线粒体(△)及粗面内质网(↑)结构正常 ×15 000 图2 实验组生精细胞线粒体空泡变性(△)、粗面内质网轻度扩张(↑)及异常结构(▲)×15 000 ★ △ △ ▲ 2.电镜:实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化。 2.2支持细胞 图3 对照组支持细胞核(★)、线粒体(△)及粗面内质网(↑)结构正常 ×15 000 图4 实验组支持细胞核(★)、线粒体空泡变性(△)、粗面内质网扩张(↑)、核膜外侧致密沉淀物(▲)及大空泡(☆) ×15 000 ★ ★ △ △ ☆ ▲ *
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