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第九章 色谱分析基础 本章主要内容 色谱概述 色谱基本参数 塔板理论 速率理论 分离度 定性定量方法 色谱法简单分类 色谱法分类 气相色谱( Gas chromatography ) 填充柱气相色谱( Packed column gas chromatography ) 毛细管气相色谱 ( Capillary column gas chromatography ) 裂解气相色谱( Pyrolysis gas chromatography ) 顶空气相色谱 ( Headspace gas chromatography ) 气相质谱联用技术( Gas chromatography-Mass spectrometry ) 色谱法分类 平面色谱法( Planar chromatography ) 薄层色谱 (Thin layer chromatography) 薄层电泳色谱 (Thin layer electrophoresis) 纸色谱(Paper chromatography) 色谱法的特点 与其它分析方法相比，具有的优点： 分离效能高 灵敏度高？？ 分析速度快 应用范围广 缺点：对未知物的定性比较困难 解决方法：与其它分析方法联用（质谱、红外和 电化学等） 载气流速与柱效——最佳流速 速率理论要点总结 分离度 分离度的表达式 分离度与基本色谱分离方程式 分离度R 的定义并没有反映影响分离度的各种因素。实际上，分离度是受柱效( n ) 、选择因子(α)和容量因子( k )三个参数的控制。 上式即为基本色谱分离方程式, 也可表示为: 同理, 可得: 也可表示为: 提高分离度的途径(1) 提高柱效 (1)增加柱长: n增加2倍时R只增大1.4倍 (2)降低塔板高度H: 是提高分离度的最好方法 (3)采用直径较小、粒度均匀的固定相 (4)控制较薄的液膜厚度 (5)选择适宜的流动相、流速和温度等 提高分离度的途径(2) 增大容量因子k R 随 k 增大而增大，但是分析时间也随之延长 为了增大k值，可采用的方法： （1）GC: 增加固定液的用量，适当降低柱温 （2）LC: 适当采用极性较小一些的流动相 提高分离度的途径(3) 增大选择性因子?值 由于?的微小变化，都对R有很大的影响，增大?值是改善分离度的最有力的手段 为了增大?值，可采用的方法： （1）GC: 适当降低柱温 （2）LC: 通过控制固定相和流动相的性质来调整? 存在的问题： ?的变化不像n和k有规律可循 相对响应值 A = 2λdp指 dp：固定相的平均颗粒直径;λ：固定相的填充不均匀因子 细而均匀的颗粒，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 A ─ 涡流扩散项 由于组分分子在色谱柱填充不均匀的固定相中移动途径不同所造成的色谱峰展宽。 B = 2 νDg ν ：弯曲因子，指填充柱内流动相扩散路径弯曲的因素 Dg：试样组分分子在流动相的扩散系数(cm2·s-1 ) 流速↓，滞留时间↑，扩散↑ B/u —分子扩散项 由于组分在液相中的扩散系数只有在气相中的1/105，因此在液相色谱中B可以忽略。 由于组分在色谱柱中沿着柱长方向的扩散所致的浓度差而引起的色谱峰展宽。 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL C = Cg + CL 扩散系数 D ↓，C ↑,分配平衡时间长，峰变宽,减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。 C · u ──传质阻力项 指组分在色谱柱流动相和固定相之间的传递过程（溶解或吸附等）存在不同的阻力而形成的色谱峰展宽。 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，流速?，柱效?。 载气流速低时： 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，流速? ，柱效? 。 H - u曲线与最佳流速： 由于流速对这两项完全相反的作用，流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值，即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。 以塔板高度H对应载气流速u作图，曲线最低点的流速即为最佳流速。 (1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因。 (2)通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。 (3)速率理论为色谱分离和操作条件选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效