环孢素a对正常人pbmcs产生ifnγ的抑制作用及其机制的研究.pdfVIP

环孢索A对正常人PBMCs产生IFNl的抑制作用及其机制的研究 细胞、NK细胞和B细胞亚群有着不同的影响“””1。通过抑制T细胞的活化，抑 制细胞表面活化分子CD25、CD69的表达”’”1。并且抑制细胞因子IL．2，IL一4， IFN吖等的产生…删。抑制树突状细胞的分化，抑制IL—i2、IL一6等细胞因子的产 生。 器官移植和自身免疫性疾病的免疫学机制的主要共同点是由细胞免疫所介 导的免疫应答参与，包括Thl细胞和CD8+T细胞。抗原提呈细胞所产生的细胞 以及增加细胞因子IFN-T和TNF—a的产生，因此促进了细胞免疫功能…删。体内 外的研究证明，当IL．12和／或IFN-?被抑制、基因被敲除或基因突变后，细胞免 疫下降，某些自身免疫性疾病得以控制“…’，移植物的存活时间延长。“”。 CsA对细胞免疫作用机制还不是十分明确，因此我们从细胞免疫角度上，研 究CsA对不同的细胞亚群的细胞因子的分泌及细胞活化分子的表达。进一步揭 示CsA的作用机制，为临床应用CsA提供了理论依据。 目的 探讨在不同刺激条件下，CsA对正常人外周血单个核细胞(PBMCs)v． 干扰素(interferon—gamma，IFN吖)产生的作用，及其作用机制的研究。 方法 (1)密度梯度离心法分离正常人PBMCs，在CsA存在或不存在的情况下， 细胞因子IL．12或在混合淋巴细胞反应(MLC)中刺激培养细胞，用ELISA方 法检测培养上清中IFN-7产生的量，观察CsA对对IFN-Y产生的影响。在CsA 存在或不存在的情况下，anti—CD3或MLC刺激培养细胞后，收集细胞，加入不 同浓度IL．12，用ELISA方法检测两次培养上清中IFN—Y产生的量，观察CsA对 Thl细胞分化的影响。 (2)在CsA存在或不存在的情况下，ami．CD3刺激培养细胞后，侵用流式细 胞仪，在单个细胞水平上评价CsA对T淋巴细胞表面活化分子CD25、细胞表面 分子IL．12R及细胞内细胞因子IFN叫和IL．2产生的影响。 结果 环孢素A对正常人PBMCs产生IFNl的抑制作用及其机制的研究 anti—CD3、 (1)正常人PBMCs在未经任何刺激的情况下不产生IFN吖， 加入CsA，CsA呈剂量依赖性抑制IFN—Y的产生。 (21 强anti—CD3刺激后PBMCs产生IFN叫的量。 预先用CsA (3)在CsA有效抑制anti—CD3和MLC产生IFN—Y的情况下， 处理的细胞与未处理组相比，IL一12诱导IFN吖的量显著减少。 IL．2产生细胞的百分率。 3 (5)Anti．CD3刺激PBMCs 胞CD25分子的表达百分率。 3 1 (6)当anti—CD3刺激PBMCs 和IL一12RB l和 IL一12RB2分子的表达百分率。 结论 生IFN．Y和Thl细胞的分化，其部分机制是抑制IL．12R的表达。 关键词 环孢素A：T细胞；v．干扰素；Thl细胞；白细胞介素12；白细胞介素12 受体 环孢素A对正常人PBMCs产生IFNl的抑制作用及其机制的研究 the Effectof Aon Productionof InhibitoryCyclOsporin Human Mechanism IFN-yby PBMCsandits Major： I