马铃薯论文马铃薯CBF3基因抗氧化酶低温胁迫光合特性.docVIP

马铃薯论文：转CBF3基因马铃薯提高抗冷性的研究 【中文摘要】低温对植物造成的伤害,表现为膜的损伤,活性氧和自由基含量增加以及一些渗透调节物质的积累等。这些现象的出现主要是由于低温对植物细胞膜系统的伤害,导致参与生命活动的各种酶的结构被破坏,活性降低,从而使细胞的代谢系统紊乱。植物光系统对低温胁迫非常敏感,在低温逆境条件下活性氧的大量积累,导致光合机构因受氧化胁迫而受损伤,光化学效率下降,同时催化光合暗反应的酶活性也因对低温敏感而降低,最终表现为光合速率的下降。本研究以拟南芥CBF3(CRT/DRE binding factor 3)基因为基因,应用农杆菌介导的转化法将35SCBF3和rd29ACBF3导入马铃薯(Solanum tuberosum L)鲁引1号块茎,实现其在马铃薯中过量表达得到转基因植株,对其进行了分子生物学的验证及光合生理指标的测定,研究转AtCBF3基因马铃薯对低温的抗性机理。主要结果如下:(1)短期及长期低温处理均导致马铃薯叶片光合速率,光合羧化效率,表观量子效率的下降。转CBF3基因马铃薯叶片降低幅度低于野生型马铃薯,诱导型启动子植株叶片低于组成型启动子植株。(2)低温处理过程中,转CBF3基因马铃薯的最大光化学效率... 【英文摘要】Low temperature may cause damages which include many aspects such as the change of the membrane lipids phase, the accumulation of some secondary metabolites, the level of reactive oxygen species and so on. All these phenomena result from the damages of some enzymes which were involved in the metabolism of plants cells. Photo systems are also very sensitive to low temperature stress, under the low temperature stress Reactive Oxygen Species (ROS) accumulates a great deal, which results in photo apparatus bein... 【关键词】马铃薯 CBF3基因 抗氧化酶 低温胁迫 光合特性 【英文关键词】CBF3 plant cold-tolerance photochemical activity potato 【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发 【目录】转CBF3基因马铃薯提高抗冷性的研究 符号说明 4-8 中文摘要 8-10 英文摘要 10-11 1 前言 12-26 1.1 植物对低温的应答 12-17 1.1.1 抗氧化系统对低温逆境的响应 13-14 1.1.2 植物细胞应对低温胁迫的渗透调节 14-15 1.1.3 植物光合机构对低温胁迫的响应 15 1.1.4 低温应答的基因调控 15-17 1.2 有关CBF 基因家族 17-22 1.2.1 植物 CBF 基因家族的发现 17-18 1.2.2 植物CBF 的序列特征 18-19 1.2.3 CBF 转录因子对COR 基因的表达调控 19-20 1.2.4 植物CBF 冷应答通路 20-22 1.3 启动子的类型 22-24 1.3.1 组成型启动子 22 1.3.2 诱导型启动子 22-23 1.3.3 组织特异型启动子 23-24 1.4 研究目的及存在的问题 24-26 2 材料与方法 26-39 2.1 实验材料与处理 26 2.1.1 实验材料 26 2.1.2 菌株与质粒 26 2.1.3 酶和生化试剂 26 2.1.4 PCR 引物 26 2.2 实验方法 26-30 2.2.1 总RNA 的提取 26-28 2.2.2 PCR 扩增 28 2.2.3 连接反应 28-29 2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 29 2.2.5 转化及克隆筛选 29 2.2.6 碱法小量提取质粒DNA 29-30 2.2.7 质粒DNA 的酶切鉴定 30 2.2.8 回收 30 2.3 原核表达载体的构建 30-33 2.3.1 获得目的基因 30 2.3.2 构建重组表达载体 30-31 2.3.3 大肠杆菌BL21 原核表达的诱导 31 2.3.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 31-32 2.3.5 重组蛋白的纯化 3