可见吸光光度法-刘东.pptxVIP

吸光光度法;吸光光度法;CuSO4溶液; 通过比较溶液颜色的深浅确定溶液浓度的方法称为比色分析法。 ;吸光光度法的特点;分析应用 ;吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～ λ关系 最大吸收波长λmax ：光吸收最大处的波长;1 吸光光度法的基本原理; 若被照射溶液是一均匀体系，散射损失可忽略不计，则：; 波长：400～760nm 可见光 ＜ 400nm 紫外光 ＞ 760nm 红外光;白光; 当照射光的光子能量与被照射粒子基态和激发态能量之差相当时才能发生吸收。; 溶液之所以呈现出不同的颜色，是由于物质对光具有选择性吸收所造成的。如：;表1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系;由以上分析可见：; 对于溶液浓度（ C ）一定，液层厚度（ b ）一定的有色溶液，在不同波长下，测定该有色溶液对光的吸收程度，即可绘制吸收曲线。;吸收曲线作用;Ⅰ：Fe2+含量为0.0002mg/ mL Ⅱ：Fe2+含量为0.0004mg/mL Ⅲ： Fe2+含量为0.0006mg/mL;由图可见：; 2、光的吸收定律; （2）吸光系数 b：cm；c：g/L；a：L·g-1·cm-1 b：cm； c：mol/L；a(ε)： L· mol-1·cm-1 ε：摩尔吸光系数;关于ε的讨论; [例1]铁(II)浓度为5×10-4g·L-1的溶液，与 1,10- 邻二氮杂菲反应，生成橙红色络合物。该络合物在波长508nm，比色皿厚度为2cm时，测得A=0.19。计算1,10-邻二氮杂菲亚铁的a及ε。;吸光度的加和性; 透光度表示入射光的透光程度：;;3、偏离郎伯-比尔定律的原因; ;（1）选用谱带a的复合光进行测量，因ε的变化较小，则偏差较小。 （2）选用谱带b的复合光进行测量，因ε的变化较大，则偏差较大。;化学因素 （1）朗伯－比尔定律假设吸收粒子是独立的，彼此之间无相互作用力，稀溶液能较好地服从该定律，当用于高浓度（c﹥0.01mol/L）溶液时，吸光度与浓度间的关系就偏离了线性关系。;2 光度计及其基本部件;1）单波长单光束分光光度计;仪器; 紫外-可见分光光度计;1、光源 可见光区：常采用钨丝灯作光源。钨丝灯加热到白炽时，将发出波长为320～2500nm的连续光谱。 近紫外区：常采用能产生180～375nm连续光谱的氢灯或氘灯作为光源。;2、单色器 将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。;（2）光栅 根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光，然后使所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围亦较宽。;3、比色皿;4、检测系统;;3）双波长分光光度法; ΔＡ＝A λ2 －A λ1 ＝（ελ2 －ελ1 ) b c 两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓度成正比。 ελ1和ελ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸光系数。;要求： a. 选择性好 b. 灵敏度高 (ε104) c. 产物的化学组成稳定 d. 化学性质稳定 e. 反应和产物有明显的颜色差别 (? λ 60nm);2、显色条件的选择; （b）这类反应需严格控制显色剂浓度。如硫氰酸盐与钼的反应：;CR;（2）酸度; 如：Al3+在pH4时发生下列水解反应： Al(H2O)63+ Al(H2O)5OH2+ +H+ 2 Al(H2O)5OH2+ Al2(H2O)6(OH)3; C：影响配合物的组成; D：显色反应酸度的确定;（3）显色温度 显色反应一般在室温下进行，有的反应需加热加速反应的进行；有的有色物质温度偏高时容易分解。对于不同反应，需通过实验找出适宜的温度。 （4）显色时间 有色化合物的形成一般会出现三种情况： 能瞬间形成，颜色很快达到稳定状态，长时间保持不变； 虽能迅速形成，但很快开始褪色； 形成缓慢，需一定时间后颜色才稳定。 需通过实验作出一定温度下A～T曲线，求出适宜的显色时间。;（5）干扰的消除; 选择适当的显色条件; 分离干扰离子;3、显色剂;发色团－分子中含有一个或一个以上不饱和键的基团，它们往往是有颜色的，如：偶氮基-N=N-、亚硝基-N=O 、;有机显色剂： 偶氮类：偶氮胂III;三苯甲烷类 三苯甲烷