第4章 紫外分光光度法_20160503233532.pptVIP

4)检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有硒光电池、光电管或光电倍增管。 5)结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理. 2.2 分光光度计的类型 1.单波长单光束 721、722、752型等,简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 2.单波长双光束 国产730、UV-240型等,自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 3.双波长 两波长处测得的吸光度差值ΔA与待测组分浓度成正比。ελ1和ελ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸光系数。 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。 ΔA ＝Aλ2 －Aλ1 ＝ (ελ2 －ελ1)b c §3 测量条件的选择 1、测定条件的选择 1.选择适当的入射波长 一般应该选择λmax为入射光波长。但如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 2.选择合适的参比溶液 为什么需要使用参比溶液？ 测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。 参比溶液的选择一般遵循以下原则： ⑴若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； （2）若待测试液在测定波长处有吸收，则可用“试样空白” 作参比溶液. 最佳读数范围与最佳值 设：ΔT=1%，则可绘出溶液浓度相对误差Δc/c与其透光度T 的关系曲线。 如图所示： 当：ΔT =1%，T在20%～65%之间时，浓度相对误差较小，最佳读数范围。 3.控制适宜的吸光度（读数范围） 应尽量使溶液透光度值在T%=20～65％ (吸光度A=0.70～0.20)。 预习：红外分光光度法 * * 第4章 紫外-可见光分光光度法  Ultraviolet and Visible spectrophotometry UV-Vis 10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm ? ?射线 x射线 紫外光 红外光 微波 无线电波 可 见 光 §1 光谱概述 光谱的划分 波谱区 ?-射线 波长 5~140 pm 跃迁类型 核能级 X-射线 远紫外光 10-3~10nm 10~200nm 原子内层电子 近紫外光 可见光 200~400nm 400~750nm 原子外层电子/分子成键电子 波谱区 近红外光 中红外光 波长 0.75~2.5?m 2.5~50?m 跃迁类型 分子振动 远红外光 微波 射频 50~1990?m 0.1~100cm 1~100 m 分子转动 电子、核自旋 §1 紫外-可见光分光光度法 基于物质的分子对可见和紫外区域辐射的吸收而进行分析的方法,广泛用于无机物和有机化合物的定性、定量分析。 紫外-可见吸收光谱波长范围 远紫外光区(真空紫外区): 100-200nm 近紫外光区: 200-400nm 可见光区: 400-800nm 1.1 分子吸收光谱的产生 1. 物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动； （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动； （3）分子本身绕其重心的转动。 2. 对应三种能级：电子能级、振动能级和转动能级 能量: 电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er 而且: Εe Εv Εr 分子能量: E＝Ee+Ev+Er （1）电子能级: 电子的跃迁能约为1-20 eV，比分子振动能级差要大几十倍，所吸收光的波长约为12.5 - 0.06?m，主要在真空紫外到可见光区，对应形成的光谱，称为电子光谱或紫外、可见吸收光谱 (2）振动能级:分子的振动能级差一般在0.05 - 1 eV， 需吸收波长约为25 -1.25?m的红外光才能产生跃迁。在分子振动时同时有分子的转动运动。这样，分子振动产生的吸收光谱中，包括转动光谱，故常称为振-转光谱。 讨论： （3）转动能级:转动能级间的能量差ΔΕr：0.005～ 0.050eV，产生此能级的跃迁，需吸收波长约为250-25?m的远红外光,吸收光谱位于远红外区。形成的光谱称为远红外光谱或分子转动光谱； 1.2 电子跃迁类型 根据分子轨道理论，有机分子的分子轨道按能级不同，分为成键、非键和反键轨道；成键轨道或