第八章核酸的酶促降解和核苷酸代谢 - 华中农业大学.PDFVIP

第八章核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 第二节 核苷酸的降解 第三节核苷酸的合成代谢 第八章核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 一、降解方式 核酸 核酸E 核苷酸 +H O 2 3’，5’-磷酸二酯键水解 二、核酸E （一）按底物分： DNA酶，RNA酶，有的酶可作用于DNA 和RNA （二）按作用方式分： 1、核酸外切E：从核酸链的一端 逐个水解下核苷酸的酶（非特异性的） 3’-核酸外切E：如蛇毒磷酸二酯E 从3’－OH端开始，生成5 ’-核苷酸 5’-核酸外切E：如牛脾磷酸二酯E 从5’－OH端开始，生成3’-核苷酸 2、核酸内切E：特异水解DNA或RNA 分子内的磷酸二酯键的酶(特异性强)。 如：牛胰核糖核酸酶：切嘧啶核苷3’ －磷酸与相邻核苷酸的3’，5’－磷酸二 酯键。 B B G B Py B B B HO P P P P P P P OH 牛脾磷酸二酯E 蛇毒磷酸二酯E 牛胰核酸E(RNase I) RNase T1 限制性内切酶 定义：细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到，能识 别特定的核苷酸顺序，但在细菌本身的 DNA中，这些顺序已被甲基化，因而不被 水解，也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身，故称限制性酶。 限制酶都以内切方式水解DNA 产物：5’为P，3’为OH 特点：有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性，而非对一种或几种 碱基专一），对底物DNA有特异的识别 位点，这些位点一般在4-8bp，通常具 回文结构，切割后形成粘性末端（或 平齐末端） 回文结构：DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180。后，与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端：双链DNA分子经限制性E 作用后，每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基，这样的末端称～。 5’… pGAATTCp…3’EcoRI 5’…pG AATTCp…3’ 3’… pCTTAAGp…5’ 3’…pCTTAA Gp …5’ 大肠杆菌限制性内切E EcoRI 菌属 菌种 菌株 酶编号 3、核酸内切兼外切E：例：核酸酶 P1，先内切再外切 第二节 核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 核苷酸酶 核苷酸 核苷 H O Pi 2 核苷磷酸化E 核苷水解E 碱基 + 戊糖-1-P 碱基 + 戊糖 （所有生物体） （植物、微生物， 且只对核糖核苷作用） 二、嘌呤的降解 腺嘌呤