大鼠烫伤模型肠黏膜蛋白质组的分离鉴定及其功能分析.pdfVIP

中华损伤与修复杂志(电子版)20O7年第2卷第4期 Chin J Injury Repair Wound Healing(Electron Ver)，August 2007，Vol 2，No．4 ·219 ． 论著 ． 大鼠烫伤模型肠黏膜蛋白质组的 分离鉴定及其功能分析 王晓军 孙永华 王建宁 宋国成 高继东 殷岳 郑明非 作者简介：王晓军，44岁，外科博士，副主任医师，硕士研究生导师，北京市第六医院外科主 任，血管整形美容外科主任，外科教研室主任。曾任和正在担任中国人民解放军北京军区烧伤 整形专业委员会副主任委员、北京市第三届血管外科专业纽委员。获得国家、北京市和军队科 技进步及医疗成果奖共1O项，撰写科研论文3O余篇，主编及参编专著3部，曾经和正在承担国 家自然基金委员会资助的重大“项目烧伤早期损害与创面愈合发病机理”(编、重 点课题“内毒素对内皮细胞直接损伤的机理研究”(编、国家重点基础研究发展规 划“973”项目(编号：G199905420)、“严重烧伤早期全身性损害与组织修复的基础研究”、军队 “十五”课题和北京市东城区科委资助的科研课题多项。主要专长为下肢肿胀、下肢疼痛和下肢 及足部感染溃烂创面的诊断和修复治疗，创伤后瘢痕形成的修复治疗，整形美容外科的所有手 术治疗。 【摘要】 目的 研究严重烧伤后早期肠黏膜蛋白质组的整体变化特性及功能，并对明确的蛋白 质进行临床意义分析，为探讨严重烧伤后肠黏膜损害的发病机制和促进肠黏膜的修复提供理论依据。 方法 采用大鼠Ⅲ度烫伤模型，利用高分辨双向电泳(2-DE)对肠黏膜组织进行蛋白质分离，Im． ageMaster 2D Elite图像分析软件进行分析，应用生物质谱、蛋白质库及文献的分析等技术研究大鼠烫 伤后肠黏膜蛋白质组的变化特性。结果 (1)烧伤后6 h和12 h两组明确下调的蛋白质点数为34， 进行鉴定及分析的蛋白质22个，分别参与线粒体的变化(如线粒体乌头酸酶、丙酰辅酶A羧化酶、肝 脏F1ATP酶重链A、短链羟酰基辅酶A脱氢酶、P一电子转移[传递]黄素蛋白Ot亚基六种)、参与代谢 (如磷酸丙糖异构酶1和细胞溶质环氧化物水解酶)、细胞骨架(如纤维单元素、类动力蛋白_5、肌钙蛋 白-2和碱性肌浆球蛋白轻链3四种)、参与调控(如糖皮质激素诱导蛋白、核因子1-B2、BRCA1、雌二 醇安息香酸盐转录因子、G．蛋白13-2亚基、N一甲基一D-天门冬氨酸受体1六种)和免疫调控(如T细胞 受体一V一86和Ig重链V区蛋白1)；(2)烧伤后6 h和12 h两组明确上调的蛋白质点数为12，进行检测 及功能分析的蛋白质1O个。参与了应激反应(如糖调控蛋白前体78、蛋白质二硫化物异构酶A3 (PDIA3)前体、基质金属蛋白酶11、0【一烯醇酶和鸟氨酸转化酶)和其他蛋白质(如白蛋白、乳酸脱氢酶 A、T细胞活化连接蛋白、辅酶Q和eps8捆绑蛋白)的变化。结论 本研究从和线粒体有关的蛋白质 的改变、骨架及基质蛋白的变化、代谢的调控、激素因子分泌的信号调控、免疫反应、应激反应和其他 蛋白质的改变等7个方面揭示了严重烧伤后早期肠黏膜屏障的病理生理变化特性，以线粒体和对激 素及因子的调控的病理生理改变最为突出。 【关键词】 烧伤；肠黏膜；蛋白质组；双向凝胶电泳 Separation。identification and functional analysis of the proteomics ofintestinal mllcosa in scalded rats WANG Xiao n，SUN y0 一hua，WANG Jian一， ，SONG Guo—cheng，GAO 一如 ，YIN Yue，ZHENG Ming-fei．Department ofSecond Surgery， 6疣Municipal Hospital ofBe ng，Beijing 100007，China 【Abstract】 Objectives To explore the function and the features of the integral changes in the pro— teomics of intestinal mucosa after severe burn injury，and to analyze the clinical signif