第五课 沉淀法生物工程下游技术.pptVIP

* MgSO4用以去除DNA和其他核酸； CaCO3用于分离乳酸，血清蛋白和柠檬酸 * * * * * * * * * 如苯丙氨酸被认为是最疏水的，而精氨酸则是最亲水的。疏水性氨基酸含量高的蛋白质的疏水区大，疏水性强。 * * 蛋白质的水溶液呈胶体性质。蛋白质的溶解度也取决于水的可利用度。 ⑴蛋白质周围的水化层（hydration shell)，保护了蛋白质粒子，避免了相互碰撞，使蛋白质形成稳定的胶体溶液。 ⑵蛋白质分子间静电排斥作用。偏离等电点的蛋白质净电荷或正或负，成为带电粒子，在电解质溶液中吸引相反电荷 的离子（简称反离子），形成扩散双电层，当双电层的δ电位足够大时静电斥力抵御分子间的相互吸引作用（分子间 力），使蛋白质溶液处于稳定状态。 * 盐析是可逆的，而变性是不可逆的. 水溶液中蛋白质的溶解度一般在生理离子强度范围内最大，而低于或高于此范围时溶解度均降低。 * （1）破坏水化膜，分子间易碰撞聚集， 将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子有很强的水化力，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失，使蛋白质分子因热运动碰撞聚集。 （2）破坏水化膜，暴露出疏水区域，由于疏水区域间作用使蛋白质聚集而沉淀，疏水区域越多，越易沉淀。 （3）中和电荷，减少静电斥力， 中性盐加入蛋白质溶液后，蛋白质表面电荷大量被中和，静电斥力降低，导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。