组织S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶连续循环比色法定课件.docVIP

组织S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶连续循环比色法定课件.doc

  1. 1、本文档共5页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
组织S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶连续循环比色法定量检测试剂盒组织S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶连续循环比色法定量检测试剂腺苷同型半胱氨酸核苷酶醌亚胺S-腺苷甲硫氨酸S-腺苷甲硫氨酸S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosylmethionine;SAM或AdoMet)是参与甲基转移的辅酶,通过甲硫氨酸腺苷转移酶(methionine adenosyltransferase)催化腺苷三磷酸(adenosine triphosphate;ATP)和甲硫氨酸(methionine)结合而成C15H23N6O5S。作为供体,参与转甲基(transmethylation)、转硫(transsulfuration和转氨丙基transamino propylation)代谢。S-腺苷甲硫氨酸S-腺苷甲硫氨酸S-腺苷甲硫氨酸与抑郁症、痴呆dementia)、空泡性脊髓病vacuolar myelopathy)、维生素B12缺乏症(vitamin B12 deficiency发生有关。S-腺苷甲硫氨酸通过M.SssI;42KD)把甲基基团转移到底物分子poly[dI-C) d(I-C)]上生成S腺苷同型半胱氨酸,进而快速被腺苷同型半胱氨酸核苷酶分解为S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤,腺嘌呤Adenine deaminase)产生次黄嘌呤,通过黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)催化,生成过氧化氢,然后借助过氧化酶(peroxidase)的作用,与对羟基苯甲酸hydroxybenzoic acid)和氨基安替比林4-aminoantipyrine)反应,形成有色醌亚胺(quinoneimine),通过其吸收峰值的变化(510nm波长),来定量分析S-腺苷甲硫氨酸的含量。其反应系统为: M.SssI poly[dI-C) d(I-C)] + S-adenosylmethionine → methyl poly[d(I-C) d(I-C)] + S-adenosylhomocysteine AdoHcy nucleosidase S-adenosylhomocysteine → adenine + S-ribosylhomocysteine Adenine deaminase adenine → hypoxanthine xanthine oxidase hypoxanthine + H2O + O2 → urate + H2O2 peroxidase 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine → quinoneimine + 4H2O 产品内容 清理液(Reagent A) 60毫升 裂解液(Reagent B) 10毫升 转化液(Reagent C) 250微升 缓冲液(Reagent D) 3毫升 底物液(Reagent E) 250微升 反应液(Reagent F) 250微升 阴性液(Reagent G) 250微升 产品说明书 1份 保存方式 保存 清理液(Reagent A)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里; 底物液(Reagent E)避免光照;有效保证6月 15毫升锥形离心管恒温培养箱或水槽:用于反应孵育 比色皿或96孔板:用于比色的容器 分光光度仪或酶标仪:用于比色分析 样品准备 手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量 (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管 (选择步骤)加入3毫清理液(Reagent A)清洗1次 移入到一个液氮冻存管 即刻放进液氮罐过夜 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意:切莫使组织冻融) 放进一个15毫升锥形离心管 加入预冷的500微升 裂解液(Reagent B) 转移到预冷的1.5毫升离心管 强力涡旋震荡30秒,充分混匀 置于冰槽里孵育30分钟,期间每10分钟强力涡旋震荡30秒(注意:如需暂时停止,放进-70℃冰箱里储存备用) 放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415) 小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1

文档评论(0)

xiaofei2001129 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档