重金属降解微生物.pptx

重金属降解微生物;研究背景与一些概念 微生物对重金属的作用机理 重金属降解微生物的应用技术;重金属危害的途径; Cr,Cu,Ni,Zn等重金属元素是微生物的必须元素，它们在微生物生化反应中起催化剂作用，并稳定蛋白质结构、细胞壁及渗透压平衡。 Ag，Hg，Pb，Cd等重金属元素是微生物的非必需元素，它们与必须元素竞争取代微生物细胞上的结合位点，与配基反应，产生毒害作用。导致核酸、蛋白质构象改变，干扰氧化磷酸化和渗透压平衡。 如：微生物蛋白质合成的启动阶段需要Mg离子的参与，在重金属污染的环境下，Mg离子被重金属发生交换，使蛋白质合成受阻。 ; 因此，在自然环境的选择压力下，微生物进化出了各种不同的抗性机制。; 重金属降解微生物：利用微生物对重金属具有一定的抗性和解毒作用，可以吸附和转化重金属的特性，用以消除重金属污染、提取贵重金属的一类微生物。;(一)微生物对重金属的抗性机制;吸附作用; 细菌细胞壁表面带有负电荷 蓝细菌、真菌和一些藻类可以产生带有负电荷的胞外多糖 它们都可与有害重金属静电结合;络合离子Cu(NH3)42+;胞外沉淀;胞内隔绝;主动运输;;;转化解毒;总结; 微生物对重金属的抗性多是由染色体外的质粒或转座子上的抗性基因决定。抗性基因编码金属解毒酶催化高毒性金属转化为低毒形态,其中对微生物汞的转化研究最为清楚。革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌中都发现了 Hg2 +抗性菌株。它们含有一套 Hg2 +抗性操纵子(mer),可编码重金属解毒酶、编码调节蛋白、周质结合蛋白、细胞膜转移蛋白。不但对重金属解毒,还具有运输及自我调节等一系列功能。 Hg2 +抗性操纵子(mer)可编码2个解毒酶。第一个是有机汞裂解酶,催化反应式为: RHgX + H++ X —— RH + HgX2 第二个为汞还原酶,催化反应式: Hg(SR) 2 + NADPH + H+ —— Hg(0) + NAPDH++ 2RSH 产生的金属汞穿过细胞膜,重新释放到周边环境中。;重金属降解微生物的应用技术 ——微生物修复技术;微生物淋滤技术;微生物表面展示技术;表面展示技术:利用基因工程手段，将外源目的基因克隆到特定的表达载体中， 使其表达产物（重金属结合肽）与外膜蛋白或噬菌体外壳蛋白以融合蛋白的形式呈现在细胞表面或噬菌体表面。 融合蛋白赋予微生物对重金属的亲和力，或增强其原本的亲和能力。如：通过多肽上的组氨酸和半胱氨酸等氨基酸残基，实现对重金属的亲和吸附。 ;重金属结合多肽可以是从抗性菌株中获得的天然多肽，也可以是人工改造的更高效的合成多肽。;组氨酸Histidine (图左） 半胱氨酸（图右）：与Ag+，Hg+，Cu+等金属离子可形成不溶性的硫醇盐。即R－S－M′， R－S－M″－S－R（M′， M″各为1价、2价金属）。 ;细菌表面展示技术;酵母表面展示技术;噬菌体表面展示技术;噬菌体随机肽库展示技术;噬菌体随机肽库展示技术;该技术的主要特点： 1、将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内，即在噬菌体表面展示特定蛋白质，而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。 2、这项技术把基因表达产物与亲和筛选结合起来，可以利用适当的靶蛋白将目的蛋白或多肽挑选出来。 3、筛选获得的多肽基因可导入工程菌细胞内表达，增强其对某一重金属的降解，或增加其可降解的重金属种类。;植物菌根修复技术;根菌对重金属修复的作用;;异位修复技术;原位修复技术;微生物修复技术的局限性;如何获得高效降解菌株？;谢谢!