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透明质酸的分离纯化研究进展 沈自慧 （烟台大学生命科学学院 烟台 264005） 摘要：综述了透明质酸的的理化性质和生理功能，介绍了透明质酸的生产工艺，对预处理、分离、纯化各阶段的工艺方法进行了系统比较和分析。 关键词：透明质酸；生产工艺；分离纯化 Research progress on separation and purification of hyaluronic acid SHEN Zi-hui (School of Life Sciences,Yantai University,Yantai 264005) Abstract：he physical and chemical properties and the physiological functions of the hyaluronic acid have been reviewed. Techniques of production have also been introduced. Techniques in pretreatment, separation and purification stages have been analyzed systematically. Key words：hyaluronic acid透明质酸(Hyaluronic Acid，β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基-D-氨基葡糖交替聚合而成1 透明质酸的生产工艺主要分为The comparison of extraction method and fermentation method 项目 提取法 发酵法 存在状态 在原料中与蛋白质和其他多糖形成复合体，分离精制复杂 在发酵液中游离存在，分离精制容易 品质与产量 取决于动物的品质和数量 品质稳定，产量大 分子量与保湿性 10×105Da, 保湿性差 15×105Da, 保湿性强 价格 高 低 应用范围 较小 广 其中从动物组织提取的工艺已相当成熟，但迫于组织来源困难价格昂贵，且得到的动物生化产品存在病毒交叉感染的风险性，目前发酵法生产HA替代组织培养提取法已成为趋势。 尽管近年来发酵法生产HA发展迅速，但我国目前的HA生产能力远不能满足市场需求，尤其高分子量的药物级别HA更需要从国外进口，因此急需解决提高HA产量和分子量的问题。 2 透明质酸的分离纯化2.2 分离工艺乙醇CPC(全名氯代十六烷基吡啶)是一种季氨盐，在水溶液中带正电荷，而HA在水溶液中带负电荷，在低盐浓度下HA能特异性地与CPC络合沉淀高盐浓度下HA-CPC络合物解离并溶解，利用HA这一性质可以将其先络合沉淀，与其他杂质分开，然后在高盐浓度下在将其溶解，从而达到分离纯化HA的目的。吴华昌等采用葡聚糖凝胶G-100。以0.1 molL氯化钠溶液为洗脱剂，在优化的凝胶层析条件(层析柱高度30 cm、进样量2 m、洗脱流速1 m4 min)下，对透明质酸发酵液进行分离纯化，得到了高纯度的透明质酸。Rangaswamyμm过滤器过滤，最后得到HA的分子量为4×106Da，蛋白质含量少于0.1%， 达到医用级别的标准，但是由于该方法的局限性很难适用于工业生产 。 3 结语 随着市场需求的扩大，开发高纯度、高分子量的的透明质酸成为我国透明质酸产业化面临的重要课题，而下游分离纯化工艺是获得高品质HA的关键，从发酵液中分离纯化制得高纯度、高分子量的HA，必须考虑工艺条件对HA的影响，根据发酵液特性及分离纯化特点找到合适的分离纯化方法。HA分离纯化工艺研究的重点在于：对分离纯化方法进行优化组合，操作精细化，在降低生产成本的同时提高分离纯化工艺的安全性，提高操作上的简捷性，探索适合于工业化生产的工艺路线，提高HA纯度的同时尽量保持高的分子量。HA的研发以及纯化工艺的改进将成为当前的发展趋势。 参考文献 [1] 黄光斗，赵宇，张方樱，等. 透明质酸的制备与应用研究进展[J]. 广西轻工业, 2002, 124~27. [2] 凌裴学. 透明质酸[M]. 北京：中国轻工业出版社，2000：5~15.[3] 顾其胜，王文斌，由少华，等. YY 0308-1998，医用透明质酸钠凝胶中华人民共和国医药行业标准[S]. 北京：中国标准出版社，1998.[4] 史鹏，蔡海波，杨利，等. 发酵液预处理方法对透明质酸分子量降低的影响[J]. 中国医药工业杂志，2005，36：741~743.[5] 郭育涛，陈坚，高海军，等. 发酵液中透明质酸提取的新方法[J]. 无锡轻工大学学报，2000，19(5)：437~439.[6] 王大为，张艳荣，沙坤. 中国林蛙皮多糖类天然保湿因子的提取与鉴定[J]. 吉林农业大学学报，2002，24(6)：99~102.[7] 郭学平，