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知识点6 发酵工艺过程控制

知识点3.2 第一节 发酵过程中的代谢变化与控制参数 第二节 温度对发酵的影响及其控制 第三节 pH值对发酵的影响及其控制 知识点3.2 第四节 溶解氧对发酵的影响及其控制 第五节 菌体浓度与基质对发酵的影响及其控制 第六节 CO2和呼吸商 知识点3.2 第七节 补料的控制 第八节 泡沫对发酵的影响及其控制 第九节 发酵终点的判断 第十节 发酵过程检测与自控 第一节 发酵过程中的代谢变化与控制参数 微生物发酵有三种方式即分批发酵(batch fermentation)、补料分批发酵(fed-batch fermentation)和连续发酵(continuous fermentation)。 工业上为了防止出现菌种衰退和杂菌污染等实际问题,大都采用分批发酵或补料分批发酵这两种方式。 一、初级代谢的代谢变化 生长过程仍显示停滞期(1、2)、对数期(3、4)、稳定期(5)和衰亡期(6)等生长史的特征。 工业发酵中往往要接入处于对数期(特别是中期)的菌体,以尽量缩短停滞期。 二、次级代谢的代谢变化 次级代谢产物的发酵属于菌体的生长与产物非偶联的类型,菌体生长繁殖阶段(又称生长期)与产物生成阶段(又称生产期)是分开的。 ⒈ 菌体生长阶段 菌体DNA含量达到定值,即不进行繁殖,细胞数量恒定,但多元醇、脂类等细胞内含物仍在积累,使菌体干重增加,此时开始合成产物,此刻的菌体浓度称为临界浓度。 这个阶段一般又称为菌体生长期或发酵前期,也有人称为平衡期 ⒉ 产物生成阶段 这阶段一般称为产物生产期或发酵中期。 ⒊ 菌体自溶阶段 这个阶段一般称为菌体自溶期或发酵后期。 根据发酵过程中的参数变化绘制出的次级代谢的代谢曲线,可清楚地说明过程中的代谢变化,并反映出碳源、氮源的利用和pH值、菌体浓度和产物浓度等参数之间的相互关系。 分析研究代谢曲线,还有利于掌握发酵代谢变化的规律和发现工艺控制中存在的问题,有助于改进工艺,提高产物的产量。 三、发酵过程的主要控制参数 ⑴ pH值(酸碱度) ⑽ 浊度(OD值) ⑵ 温度(℃) (11) 料液流量 ⑶ 溶氧浓度(DO值,简称溶氧) ⑷ 基质含量 (12) 产物的浓度 ⑸ 空气流量 (13) 氧化还原电位 ⑹ 压力 (14) 废气中的氧含量 ⑺ 搅拌转速 (15) 废气中的CO2含量 ⑻ 搅拌功率 (16) 菌丝形态 ⑼ 黏度 (17) 菌体浓度(简称菌浓) 第二节 温度对发酵的影响及其控制 一、温度对发酵的影响 温度会影响各种酶反应的速率,改变菌体代谢产物的合成方向,影响微生物的代谢调控机制,影响发酵液的理化性质,进而影响发酵的动力学特性和产物的生物合成。 温度对化学反应速度的影响常用温度系数(Q10)(温度每升高10 ℃,化学反应速度所增加的倍数)来表示。 发酵液的黏度、基质和氧在发酵液中的溶解度和传递速率、某些基质的分解吸收速率等,都受温度变化的影响,进而影响发酵动力学特性和产物的生物合成。 二、影响发酵温度变化的因素 产热的因素有生物热(Q生物)和搅拌热(Q搅拌);散热因素有蒸发热(Q蒸发)、辐射热(Q辐射)和显热(Q显)。产生的热能减去散失的热能,所得的净热量就是发酵热[Q发酵,kJ/(m3·h)], 即 Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q显-Q辐射。这就是发酵温度变化的主要因素。 ⒈ 生物热(Q生物); ⒉ 搅拌热(Q搅拌); ⒊ 蒸发热(Q蒸发) ;⒋ 辐射热(Q辐射) 三、温度的控制 ⒈ 最适温度的选择 最适生长温度与最适生产温度往往是不一致的,可采用变温发酵。 ⒉ 温度的控制 第三节 pH值对发酵的影响及其控制 一、pH值对发酵的影响 ① 影响酶的活性,当pH值抑制菌体中某些酶的活性时,会阻碍菌体的新陈代谢;② 影响微生物细胞膜所带电荷的状态,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄;③ 影响培养基中某些组分的解离,进而微生物对这些成分的吸收;④ pH值不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。 二、发酵过程pH值的变化 三、发酵pH值的确定和控制 ⒈ 发酵pH值的确定 同一菌种,生长最适pH值可能与产物合成的最适pH值是不一样的。 同一产物的最适pH值,还与所用的菌种、培养基组成和培养条件有关。 ⒉ pH值的控制 在各种类型的发酵过程中,实验所得的最适pH值、菌体的比生长速率(μ)和产物比生成速率(Qp)等3个参数的相互关系有四种情况 ① 第一种情况是μ和Qp的最适pH值都在一个相似的较宽的适宜范围内(a),这种发酵过程易于控制;② 第二种情况是Qp (或μ)的最适pH值范围很窄,而μ(或Qp)的

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