木霉菌对3种蔬菜病原菌的拮抗作用.pdfVIP

河北科技师范学院学报 第2l卷第4期，2007年l2月 Journal of Hebei Normal University of Science＆Technology Vo1．21 No．4 Dec．2007 木霉菌对3种蔬菜病原茵的拮抗作用 高玉峰 ，贺字典 ，赵春明 (1西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌，712100；2河北科技师范学院农学系) 摘要：测定了11种木霉对黄瓜枯萎尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病瓜疮痂枝孢霉(Cladospori一 啪 cucumerinum)和番茄叶霉病褐孢霉(Fulviafulva)的拮抗作用，筛选出l株M 粘绿木霉对3种病菌均有较 强拮抗作用，而且对黄瓜枯萎病的室内盆栽防效可达65．66％。与此同时还观察到多数木霉生长速度快、生 长繁茂，快速覆盖病原菌的菌落，竞争作用、抗生作用和重寄生作用是其主要作用机制。 关键词：蔬菜病原真菌；木霉菌；拮抗作用 中图分类号：$436．341．1；$476 文献标志码：A 文章编号：1672-7983(2007)04-0012-03 由于保护地特定的环境条件，病害发生相当严重，其中以枯萎病、灰霉病、叶霉病发生最为严重，一 般损失20％，重者超过40％。而黑星病是近几年蔓延开来的一种检疫性病害。对于这些病害的防治长 期以来一直依赖于化学农药。但由于化学农药的使用一方面诱发病菌抗药性加剧，另一方面增强了农 药对环境的污染及农药残留问题，这与当前绿色、环保的需求洽好相反。自1932年Weind6ng发现木霉 对病原菌具有拮抗作用以来，哈茨木霉( harizanum)、康宁木霉( koningii)、钩状木霉( hamatum)、 绿色木霉( ,,iride)、长枝木霉( longbrangchiatum)、粘绿木霉( virens)¨ 就被广泛进行了拮抗作 用、机制和防治效果的研究。但多集中于土传病害的抑制作用，而对叶部病害病原菌的抑制作用研究的 较少。本试验用从蔬菜保护地土壤中分离到的1 1种不同种类的木霉对黄瓜枯萎尖孢镰刀菌( oxys— porum)、黄瓜黑星病瓜疮痂枝孢霉(C．cucumerinum)和番茄叶霉病褐孢霉( fulva)的拮抗作用、拮抗机 制和防治效果进行了研究，以期为将来进行多功能生防菌剂的配制和田间应用提供一定的数据。 1 材料和方法 1．1 材料 1．1．1 病原茵 从河北省昌黎县蔬菜保护地中采集黄瓜、番茄病叶和病茎进行分离培养，鉴定为尖孢 镰刀菌(Fusarium oxysprorium)、瓜疮痂枝孢霉(Cladosporium cucumerinum)和褐孢霉(Fulvia丘lva)。 1．1．2 木霉菌株 从河北省不同地区蔬菜保护地中蔬菜根际土壤中采用稀释分离法进行分离，经形态 学鉴定为不同种类的木霉 ，编号分别为M 一M。。。 1．2 拮抗作用测定 采用平板对峙培养法，用直径5 mm的打孔器取新鲜培养的木霉和3种病原菌的菌丝块，将木霉与 病原菌分别同时接人PSA平板(培养皿直径9 cm)，两者相距5 cm，5次重复，分别以病原菌和木霉在 PSA上的纯培养为对照，25℃恒温培养，逐日观察菌落的生长和木霉菌的抑制作用，连续观察7—10 d， 待对照菌丝长满培养皿时测量处理病原菌菌落半径，计算抑菌率。 抑菌率=[(对照菌落半径一对峙菌落半径)／对照菌落半径]×100％ 当木霉与病原菌对峙培养的菌落接触后，从界面处挑取菌丝做涂片，在光学显微镜下直接观察两种 菌丝的交接情况和两者间的相互作用。 1．3 温室防效测定 将抑菌效果较好的菌株进行温室防效测定，黄瓜种子经表面消毒催芽后播种于直径10 am的营养 钵内，每盆2粒种子。当黄瓜苗长到2—3个复叶时，向瓜苗根际土壤中注射浓度为10 cfu／mL木霉菌 基金项目：河北省科技厅指导课题(课题编号。 收稿日期：2007—11—15；修改稿收到日期：2007—12—14 4期 高玉峰等 木霉菌对3种蔬菜病原曲的拮抗作用 孢子悬浮液，每株接人5 mL孢子悬浮液，用无菌土覆盖2—3 cm。3 d后接人尖孢镰孢菌孢子悬浮液 (10 efu／mL)，每株接人3 mL。对照只接种尖孢镰孢菌，每个处理12盆，3次重复。25 d后调查发病 率、计算疴隋指数及相对防治效果。 黄瓜枯