杜马斯燃烧定氮法和凯氏定氮法如何选择.PDF

福斯白皮书 杜马斯燃烧定氮法和 凯氏定氮法如何选择？ 食物和饲料的氮/蛋白质分析比较和注意事项 —— 约斯特·米勒博士（Dr ·Jürgen Müller ） 2014年8月1日发行，P/N1026738 杜马斯法 杜马斯燃烧法是一种对有机基体（常态）中总氮含量进行测定的方法。样品在氧气环境下进行高温燃烧，通过后续的 氧化管和还原管，氮被定量转化为氮气（N2 )，其他易挥发的燃烧产物被收集或者分离。氮气由热导检测器检测，结 果以%或mg氮的形式给出，然后，通过氮与蛋白质的换算系数（如表一）计算出蛋白质含量。 表1：氮转化成蛋白质的转化因素 （从ISO 16634-1:2008 中选取的例子） 商品 转化因素 大麦 5 . 88 椰子粕 5 .30 燕麦 5 .50 稻米 5 .95 黑麦 5 .83 向日葵（ 种子、粕） 5 .30 大豆（种子、粉或其产品） 5 .71 黑小麦 5 .78 小麦（全粉、面粉 或者碾碎的干小麦） 5 .83 小麦（糠） 5 .26 根据ISO/TS 16634 - 2 :2009 ，普遍认为小麦、黑麦及其制品的蛋白质转换系数为5.7 ，这个标准内的其它 产品的蛋白质系数为6.25。 二十世纪九十年代，杜马斯法获得了认可，并开始挑战传统凯氏定氮法，那时，凯氏定氮法在天然蛋白质分析领域占领主 导地位已一百多年。 杜马斯法具有其自身的优势：自动化操作、操作简便。与凯氏定氮法相比，它的效率更高，每次测试只花费几分钟的时间， 而凯氏定氮法却需要一个小时甚至更久。此外，杜马斯法检测不使用有害化学物质及催化剂， 而凯氏定氮法则使用浓硫酸 或者催化剂消化样品。二十世纪九十年代，当很多国家禁止凯氏定氮法在实验中使用汞和镉时，许多实验室人员开始评估杜 马斯法（作为替换备选方法），并针对这两种方法做了大量对比研究。表二中给出了对杜马斯法认可的一系列国际标准，此 外，一些国家的谷物检验部门，如美国、加拿大和澳大利亚，也认可杜马斯法。 由于杜马斯法检测的总氮量包括无机部分，如亚硝酸盐和硝酸盐，而凯氏定氮法只检测有机氮含量和氨含量，因此，在比 较研究中，两者的检测结果出现了差异。 凯氏定氮法并不能回收所有有机氮，同时，在对含氮杂环化合物的回收中也存在 问题，比如烟酸，不过这没有被认为有问题，因为粗蛋白的测定主要目的是将α-氨基氮从氨基酸的形式转化为氨。从历 史观点上来说，传统凯氏定氮法建立的氮-蛋白质的转换系数建立在样本氨基酸模式的基础上。由于食物和饲料样品中的 成份多变，一般公认的转换系数是6 .25 ，当对不同的含氮物质使用相同的蛋白质转换系数，可能产生的结果就会有差异。 表2 ：食物与饲料中氮与蛋白质总含量测定（采用杜马斯法）标准 方法引用 名称 (Matrix) 食物产品-根据杜马斯原理通过燃烧法测定总含氮量和粗蛋白质含量。 ISO 16634-1:2008 第1部分：油菜籽和动物饲料原料 食物产品-根据杜马斯