基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析小分子化合物-分析测试中心.DOC

MALDI-TOF MS分析小分子化合物新方法 对于分子量小于400Da的化合物, 使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS) 的常规方法难以检测，这主要是由于小分子基质带来的干扰。Bruker公司AUTOFLEX III MALDI-TOF 质谱仪，氮激光，波长355nm，使用前用混合多肽（购自Bruker公司, 包括：血管紧张肽I, 血管紧张肽II, P物质, 蛙皮素, 促肾上腺皮质激素1-17, 促肾上腺皮质激素18-39, 生长激素释放抑制激素 28）外标法校正仪器。 金属酞箐化合物的合成参照已发表的文献，最终产物经过UV-Vis），MALDI-TOF MS）以及NMR）表征。样品和基质分别溶于，二者按照一定比例混合均匀，取1μl混合溶液滴在MALDI 靶上，或者直接吸取μl样品溶液滴在靶上，待溶剂自然挥发样品结晶后，送入质谱仪，进行质谱分析。实验中数据采集时所用参数如下：加速电压19kV反射模式激光频率10Hz使用最大激光能量的40-90%，累加30-200次。 2 结果与讨论 2. 1金属酞箐基质的发现 酞箐化合物是一类具有π电子共轭结构的大环化合物，具有良好的热稳定性和化学稳定性一直被广泛用作染料，此外，由于其独特的光、电、磁及对某些气体的敏感性等方面的特性而被应用于化学传感器、非线性光学材料、光盘信息记录材料、太阳能电池材料、燃料电池中的电催化材料、场效应晶体管、气体检测及光动力学治疗癌症等许多方面。 MALDI-TOF MS分析金属酞箐类化合物时，由于该类化合物在紫外可见区有吸收，可以吸收激光（波长33nm）能量，在没有基质的情况下得到分子离子峰。用基质如α-氰基-4-羟基肉桂酸CHCA）和25-二羟基苯甲酸DHB）时，三价金属酞箐化合物基质分子有作用，而与基质分子没有作用因此，三价金属酞箐化合物用于分析小分子，它可以将小分子从低质量转移到高质量，从而消除 编号 M R 1 Al3+ (aPc) [Al(aPc)]+ 827.3608 827.9269 2 Ga3+ [Ga(aPc)]+ 869.3048 870.6683 3 In3+ [In(aPc)]+ 915.2831 915.7633 4 Al3+ (pPc) [Al(pPc)]+ 1131.4860 1132.3107 5 Ga3+ [Ga(pPc)]+ 1173.4300 1175.0522 6 In3+ [In(pPc)]+ 1219.4083 1220.1472 7 Mg2+ (hPc) [Mg(hPc)] 968.2193 969.2070 8 Zn2+ [Zn(hPc)] 1008.1634 1010.3120 9 SnO Non (Pc) [SnO(Pc)] 648.0469 647.2324 10 SnF2 [SnF2(Pc)] 670.0488 669.2299 11 TiO [TiO(Pc)] 576.0926 576.3894 图1 金属酞箐的结构 图2 紫外吸收光谱 (A) 酞箐化合物2 (B)酞箐化合物7(C) 基质CHCA (D) 基质DHB 酞箐化合物有Q带和B带两个吸收带这是π-π*跃迁引起的。MALDI-TOF MS激光波长为337nm，此波长刚好位于酞箐化合物B带吸收带内，图是酞箐化合物在200-500nm波段的紫外可见吸收光谱，它在324nm处有较高的吸收图是酞箐化合物在此波段的吸收光谱，它在340nm处有较高的吸收。MALDI-TOF MS所用的基质CCA和DHB吸收激光能量，其紫外可见吸收光谱见图和酞箐化合物的吸收峰和两个基质的吸收有很大相似之处，不同的是前者的吸收峰比较宽而后者较窄，吸收峰值不完全相同，CHCA和DHB的吸收峰值分别是340nm和339nm，更接近激光波长。酞箐化合物能吸收激光，理论上在不加基质的情况下它能产生分子离子峰。图为不加基质情况下酞箐化合物2的质谱图及实验所得同位素分布与理论同位素分布的对比。从对比中看到，二者十分吻合。 图基质情况下酞箐化合物2的质谱图(A)及理论与实际 同位素分布的对比(B) 表 使用CHCA和DHB为基质分析金属酞箐化合物 编号 Masscal. Massdet. CHCA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 827.4 869.3 915.3 1131.5 1173.4 1219.4 968.2 1008.2 648.0 670.0 576.1 1016.5 1058.4 1104.4 1320.6 1362.5 1408.5 968.2 1008.2 648.0 670.0 576.1 DHB 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 827.4 869.3