大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)酶联免疫分析试剂盒使用说明书.PDF

TEL:4001610125 SITE: 6- F1 (6-Keto-PGF1 ) 大鼠 酮前列腺素 α α酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 3ng/mL–80ng/mL 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠脑匀浆液样本中6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)水平。 用纯化的大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被 单抗的微孔中依次加入6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)，再与HRP标记的6-酮前列腺素 F1α(6-Keto-PGF1α)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜 色的深浅和样品中的6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长 下测定吸光度 （OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α) 浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20m ×1瓶 7 终止液 6m ×1瓶 2 酶标试剂 6m ×1瓶 8 标准品（160ng/mL） 0.5m ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5m×1瓶 4 样品稀释液 6m ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6m ×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6m ×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 80ng/mL 5号标准品 150μ 的原倍标准品加入150μ 标准品稀释液 40ng/mL 4号标准品 150μ 的5号标准品加入150μ 标准品稀释液 20ng/mL 3号标准品 150μ 的4号标准品加入150μ 标准品稀释液 10ng/mL 2号标准品 150μ 的3号标准品加入150μ 标准品稀释液 TEL:4001610125 SITE: 5ng/mL 1号标准品 150μ 的2号标准品加入150μ 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔 （空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μ，待测样品孔中先加样品稀释液40μ， 然后再加待测样品10μ （样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μ，空白