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与氯化铵浸渍相关的新型预处理方式 陈鸿章，李冠华，李洪强 生化工程国家重点实验室，过程工程研究所，中国科学院，中国，北京，邮编100190 摘要 提高氮含量和酶水解是涉及到纤维素乙醇生产的关键工序，用NH4Cl预浸后进行蒸汽爆炸（SE）并对其试验后的氮含量，酶消化性和乙醇产量影响进行研究。结果表明，预处理后样本中氮含量会增加，这可以作为乙醇发酵的氮源。通过90 g/l NH4Cl预浸渍并以1.4 MPa SE的样本1.1 MPa SE处理的样本，通过135 g/l NH4Cl预浸渍并以1.1 MPa SE的样本1.93 和 0.69倍的效果。这种新型预处理方式相较于常态下的处理极大的提高了氮含量和酶消化性，建议进一步的运用于工业化生产。 关键词：蒸汽爆炸，氯化铵预浸渍，酶解，生物量，乙醇。 ? ????????????????????????????? *通讯作者.电话：+86 10，传真： +86 10 电子邮件地址： hzchen@home.ipe.ac.cn （ H.Z.陈） 简称：SE，蒸汽爆炸; SERS，稻草汽爆; URS ，未经处理的稻草。 1.简介 全球气候变暖和化石燃料的枯竭导致了能够减少对化石燃料储量依赖的可替代、可再生能源越来越受到人们的关注 (Moriarty Honnery, 2012). 由于木质纤维素的大量存在，生物乙醇产品成为最有前途的生物燃料，这吸引了来自于政府和私人组织的大量关注 (Sarkar et al., 2012). 广泛的研究和试验工厂的试生产为木质纤维素生产乙醇的进一步调研和优化奠定了基础 (Chen Li, 2013) . 一般来说，木质纤维素转化为乙醇包含两个步骤：经水解将多糖转化成单糖和通过发酵将单糖转化成乙醇(Limayem Ricke, 2012). 天然木质纤维素因其具有高度的抗水解结构导致不能自然进行酶水解。(Jeoh et al., 2007).但人们已作出努力通过各种预处理来破坏复杂的抗水解结构，而酿酒酵母的培养和发酵显然已能够达到相应氮水平 (Casey Ingledew, 1986). 然而，稻秆公认属于营养缺乏型(Lau et al.,2008.). 因此，额外的营养补充被视为不可避免的。酵母粉，蛋白胨，铵盐和尿素总是被应用于工业原料。虽然有机氮源中富含的肽和游离氨基酸，但成本太高。铵常常代替有机氮源，但营养很差。 蒸汽爆炸（SE）是最有效的预处理方法之一，由于只需要较低的化学品使用量和能源消耗已被应用于工业化大生产(Chen Liu, 2007), 蒸汽爆破可以结合物理撕裂或化学降解对材料进行影响。在快速减压过程中饱和蒸汽能穿透秸秆的毛孔并撕裂大量的气孔，而材料在化学高温状态下会使其半纤维素和木质素得到降解。由此, 我们可以得出的结论是铵盐可以通过物理或是化学方式参与到材料的预处理过程中来(Martín et al., 2002.). 相较于SO2和H2SO4，NH4Cl的 (Wang et al., 1967; Barton et al., 1986).通过比较加入氯化铵预浸渍后蒸汽爆炸的结果，可知氯化铵预浸渍能增强预处理效果，这是可能是因为铵可以转化为其它类型的氮源存在，这有利于乙醇发酵。 据我们所知，很少有研究将蒸汽爆炸和氮添加工艺结合起来，所以首先我们需要评估蒸汽爆炸和氯化铵预浸渍结合起来的潜力。需要对预处理后氮含量、半纤维素、纤维素和木质素的成分变化进行测定。同时还需要根据预处理后酶水解和乙醇产量的效果对预处理的有效性进行评价。 2 材料及其方法 2.1 原材料 由中国四川省成都的农村地区收集到的水稻秸秆（Oryza sativa）。每份稻草由手工切制成15厘米大小，用湿布清洁上面灰尘，然后常温下风干。选择的纤维素酶是里氏木霉YG3，平均滤纸酶活可达到50-60 FPU/ml。在研究中所用分析纯度试剂均购买来自于中国北京化学试剂公司。 2.2 氯化铵预浸渍处理的蒸气爆炸实验 将干稻草用以1:1比例的水或氯化铵溶液（90克/升和135克/升）浸渍，并保证在室温下静置一夜。然后将预浸渍的稻草放入4.5升自主研制的蒸汽爆炸容器中（威海自动化有限公司，威海，中国）。在1.1或1.4 MPa下进行4分钟的蒸汽爆炸，卸压后可得到汽爆稻草（SERS）。另一组对照实验为干稻草预浸渍处理（以1:1的比率），并保证在室温下静置一夜，不进行蒸汽爆炸，将其作为未处理稻草（URS）。 2.3 初步水解、同步糖化以及发酵 URS和SERS直接用于同步糖化发酵试验而不进行清洗。URS和SERS的初步