植物生理实验.PDF

實驗 (一) ：利用重量比較法測量馬鈴薯組織水勢 一、 實驗目的： 教導學生用簡單的材料設備 ，以重量比較法測定植物組織的水勢。 二、 實驗原理： 植物的生長、代謝活性及其最終產量 ，明顯受植株水分狀態的影響 ，能夠方便而 確實的測定水勢及其組成要素十分重要。水勢（ water potential ，Ψ ）是指水的化學 勢 ，植物體細胞之間以及植物細胞與外界環境之間水分的移動 ，受細胞水勢的大 小而決定 ，水總是從水勢高的區域向水勢低的區域移動。當植物組織與外界溶液 接觸時 ，如果植物的水勢低於外界的水勢 ，則外界的水流向植物細胞 ，細胞之膨 壓將增大 ，反之植物組織失水而使膨壓變小；若兩者相等 ，則流入細胞的水量 ， 等於流出細胞的水量，達到動態平衡 ，此時外界溶液的水勢等於植物組織的水勢。 水勢與滲透勢（ osmotic potential ，Ψs ），壓力勢（ pressure potential ，Ψp ）的關係 為Ψ ＝Ψs ＋Ψp 。 溶液的滲透勢可用 Vant’s Hoff 公式來計算： Ψs ＝－CγRT C ：重量莫爾濃度(每 1000 公克水中之溶質莫耳數) γ ：活性係數，指溶質(solute)離子化或理想溶質的其它偏差 R ：氣體常數(0.00831 kg MPa mol-1 K-1) T ：絕對溫度(K ＝°C ＋273) 如果已知C 、γ及 T值 ，即可將水勢計算出來。 γ值是變化較小的項目 ，中性溶質 例如山梨聚糖醇 (sorbitol) 、甘露醇(mannitol)或蔗糖 (sucrose)的稀釋溶液 ，γ 值 可推測為 1.0 。因此在20°C時 1.0重量莫耳濃度 (molality; M)的山梨聚糖醇溶液 ， 滲透勢可如下計算： Ψs ＝－CγRT ＝－(1.0 mol kg-1 ) (1.0) (0.00831 kg MPa mol-1 K-1) (293 K) ＝－2.43MPa 準備同樣大小的樣品 ，秤重後置於已知濃度的溶液中 圖( 1-1) ，在試驗過程中溶液 的濃度以及滲透勢不會有明顯的變化 ，溶質種類應取不易被組織吸收者 ，例如蔗 糖、山梨聚糖醇、甘露醇及聚乙二醇 (polyethylene glycol ，PEG) 等。當外界溶液 的水勢高於或低於樣品組織的水勢 ，組織的重量會增加或降低 ，當二者水勢相 等 時組織重量不變。 三、 材料與藥品： 馬鈴薯塊莖 1個 下列不同濃度之蔗糖溶液各10 mL 0.10 M 0.20 M 0.30 M 0.40 M 0.50 M 鑽 孔器 1 組 濾 紙 4張 精密天秤 1台 鋁箔紙 8×8 公分 刀 片 1支 試 管 5支 四、 實驗方法： 1. 取 5支乾淨試管或小燒杯；每支試管內分別加入 10 mL 下列溶液：0.10 、0.20 、 0.30 、0.40 、0.50 M 不同濃度的蔗糖溶液。 2. 用直徑約 0.5 cm 之鑽孔器切下5個馬鈴薯圓柱體 圖( 1-1) ，每個圓柱體再切成 4 cm 長 ，迅速稱重後分別放入每種溶液中 ，浸一小時後 ，取出用濾紙輕輕 吸乾附著於表面的溶液 ，稱重計算各圓柱體重量的變化。 A B 圖 1-1 A.利用鑽孔器鑽取馬鈴薯圓柱體 B.利用解剖刀和尺切取等長之馬鈴 薯圓柱體 C.將切取好的馬鈴薯圓柱體秤重後放 入不同濃度的溶液中 五、