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分子生物学本3-DNA的复制与转座剖析
2.3 DNA的复制 p39-50 DNA复制的序列元件P44 大肠杆菌 复制起始点(ori C):由245bp构成 复制终点(ter):有6个22bp 的终止点位点 复制所需要的酶 DNA旋转酶(拓扑异构酶)——松弛螺旋 DNA解链酶 单链结合蛋白 引物酶 DNA聚合酶(表2-10、表2-11) DNA连接酶 DNA复制的过程 过程(动画) 起始:从固定的点(复制起点)开始 延长 终止 前导链 随从链(滞后链) 原核生物与真核生物复制的不同 复制所需的蛋白因子和酶不同(如真核DNA聚合酶:共五种,α、β、γ、δ、ε) 复制速度:是原核的1/10,但复制起始点多。 引物和冈琦片段小于原核,引物为10个核苷酸,片段100-200个核苷酸;原核引物十几-几十,片段1000-2000个核苷酸 真核生物线性染色体的两个末端具有特殊的结构,称为端粒。由端粒酶产生。 复制的几种主要方式 P41 线性DNA双链复制(如前所述) 环状DNA的双链复制 θ型 滚环式φx174 D型粒体线DNA θ型 DNA复制的调控 大肠杆菌 发生在起始阶段,一旦开始复制,如无意外受阻,就能一直进行下去 起始物位点(编码复制调节蛋白质) 复制起点 真核生物 细胞生活周期水平的调控 染色体水平的调控 复制子水平的调控 在一个复制叉之中,以下哪一种蛋白质的数量最多? A.DNA聚合酶 B.引发酶 C.SSB D.DNA解链酶 E.DNA拓扑异构酶 下列关于哺乳动物DNA复制特点的描述哪一项是错误的? A RNA引物较小 B 冈崎片断较小 C DNA聚合酶α、β、γ参与 D 仅有一个复制起点 E 片断连接时,由ATP供给能量 两个前体片段都已合成后,要把它们连接在一起,可能按下面哪种次序进行酶促反应? A DNA聚合酶Ⅰ(5’→3’核酸外切酶)、DNA聚合酶I (聚合酶)和连接酶 B DNA聚合酶Ⅰ(5’→3’核酸外切酶)、DNA聚合酶Ⅲ和连接酶 C 核糖核酸酶、DNA聚合酶Ⅲ和连接酶 D 引物酶、DNA聚合酶I和连接酶 E 解链酶、DNA聚合酶Ⅲ和连接酶 关于DNA复制的叙述,错误的是 A.引物酶的底物是NTP B.DNA聚合酶的底物是dNTP C.解螺旋酶能切断DNA再连接 D.拓扑酶切断一股或两股DNA链 E.连接酶仅连接双链DNA的单链缺口 不属于滚环复制的叙述是 A.内外环同时复制 B.M13噬菌体在E.coli的复制形式 C.滚环复制不需要引物 D.A蛋白有核酸内切酶活性 E.一边滚动一边连续复制 不属于D环复制的叙述是 A.复制时需要引物 B.线粒体DNA的复制形式 C.内外环起始点不在同一位点 D.内外环复制有时序差别 E.DNA-polε催化反应 切除修复时①DNA-polⅠ;②DNA连接酶; ③Uvr A、Uvr B;④Uvr C作用的顺序是 A.②、③、① 、④?? B.①、③、④、②???? C.③、④、①、②?? D.③、②、④、①??? E.①、②、③、④ 关于重组修复的叙述,不正确的是 A.适于DNA损伤面太大不能及时修复 B.修复线粒体DNA损伤 C.修复后损伤链并没有切去 D.以健康母链填补损伤处 E. Rec A有核酸酶活性 2.6 DNA的转座 P56-65 DNA的转座,或称移位(transposition),是由可移位因子(transposable element)介导的遗传物质重排现象。 1.转座子(Tn)定义: 是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位 可以从一个部位转移到另外一个部位的DNA序列 2.细菌转座子分类 插入序列(IS) 复合转座子 TnA家族 转座噬菌体(Mu) (1)插入序列(IS) 最简单的转座子,只含有转座所必需的元件:两端有反向重复序列(inverted repeats, 15 ~ 25 bp),中间有编码转座所需的酶的基因(转座酶,解离酶基因) 插入序列在转座时,其插入位点两旁会产生一小段正向重复(direct repeats) 较小,长度为750~1 500kb 命名: IS1, IS2, IS3, IS4 λ:IS1 Transposons contain inverted terminal repeats Generation of direct repeats in host DNA flanking a transposon (2)复合
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