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第三章 细胞生物学研究方法;第一节 细胞形态结构的观察方法;一、光学显微镜技术;普通光学显微镜成像原理;显微镜和显微技术;决定光学显微镜的分辨率的要素;临哄逃运辊涩佯蔚务究蒜孕个伟熟另单君涝放毕礁距猿触装三晴绥撵午先第三章-细胞生物学研究方法第三章-细胞生物学研究方法;（一）普通复式光学显微镜;显微镜的种类及原理;普通光学显微镜;用浸没油取代空气的作用?;Making tissue sections. How an embedded tissue is sectioned with a microtome in preparation for examination in the light microscope. ;观察结果;（二）荧光显微镜技术;The optical system of a modern fluorescence microscope. A filter set consists of two barrier filters (1 and 3) and a dichroic (beam-splitting) mirror (2). In this example the filter set for detection of the fluorescent molecule fluorescein is shown. ;Fluorescent dyes. The structures of fluorescein and tetramethylrhodamine, two dyes that are commonly used for fluorescence microscopy. Fluorescein emits green light, whereas the rhodamine dye emits red light. ;荧光显微镜的应用;荧光显微镜观察真菌的细胞核;（三）激光共焦点扫描显微镜;激光扫描共焦显微镜的原理图;荧光显微镜（A）和激光扫描共焦显微镜（B）所观察图像的比较;;?相差显微镜（phase-contrast microscope） 一种将相位差转变成振幅差（明暗差）的显微镜，可观察不染色的活细胞。 利用样品的不同位点的密度差，形成肉眼可见的明暗区别。 ?微分干涉显微镜（differential-interference microscope） 一种将样品厚度上的微小区别转化成明暗区别相差显微镜。 ?录像增差显微镜技术（video-enhance microscopy）;相差显微镜观察真菌菌丝;两种不同类型的光学显微镜所拍摄的图像比较;二、电子显微镜;二、电子显微镜技术;电子显微镜的基本结构（A）和成像原理（B）;电子显微镜与光学显微镜的区别;超薄切片技术;Specimen Preparation for Electron Microscopy;电镜超薄切片样本制备示意图;;超薄切片技术显示的动物细胞超微结构;家蚕细小病毒负染色电镜照片（病毒直径20nm）;II. Scanning electron microscope (SEM) ;; ????????????????????????????????????????????????????Figure 3-32. Cells in culture. Scanning electron micrograph of rat fibroblasts growing on the plastic surface of a tissue-culture dish.;扫描电镜原理示意图（A），扫描电镜下可清晰地显示原生动物四膜虫表面的纤毛和口器（B）;三、隧道扫描显微镜;几种显微镜可观察的样品大小（箭头之间的范围）及其分辨能力（右侧箭头所指位置）;第二节 细胞及其组分的分析方法;一、用超离心技术分离细胞组分;用密度梯度离心分离细胞组分示意图;二、细胞成分的细胞化学显示方法;A: 直接免疫荧光标记技术：利用偶联荧光分子的抗体与细胞或细胞切片进行孵育，使抗体和相应抗原结合，在荧光显微镜下对抗原进行定位的技术。 B: 间接免疫荧光标记技术：即不带荧光标记的第一抗体与相应抗原孵育形成复合物后，再用荧光标记的第二抗体识别第一抗体，从而显示抗原所在位置。 ;免疫胶体金电镜原位杂交技术的基本原理与应用（膀胱上皮细胞膜蛋白的分布：箭头所指）;四、细胞内特异核酸的定位与定性;用原位杂交技术显示Z13基因在受精后1d的斑马鱼胚胎的体节、眼和松果体中的表达（箭头所指）;五、定量细胞化学分析与细胞分选技术;流式细胞仪的工作原理;第三节 细胞培养与细胞工程;一、细胞培养;动物细胞培养;;二、细胞工程;单克