脂联素在皖南花猪脂肪中表达及对肌内脂肪影响.pdfVIP

Anhui Agricultural University Expression of Adiponectin on adipose tissue and effects of Adiponectin on Intramuscular fat of Wannanhua pigs Answerer ： T i a n l e i l e i Advisor Professor ： Z h o u J i e Major ： B a s i c Ve t e r i n a r y S c i e n c e Research Direction ： Animal Physiology and Biochemistry Institute ： C o l l e g e o f A n i m a l S c i e n c e Te c h n o l o g y Answer Committee Chairman ： MAY 2013 本课题是国家自然科学基金项目：） “脂联素对皖南花猪脂肪沉积和脂肪-肌肉相互作用的影响” 摘要 皖南花猪是优良的安徽省地方猪种，其优点主要在于肉质好和繁育性能强。脂肪 组织不仅是一个储存脂肪组织。脂联素（Adiponectin, Adp）是由脂肪组织分泌的细胞 因子，到目前为止它是唯一伴随脂肪变多而它的血液浓度却是降低的细胞因子。本实 验通过分析肾周脂肪、皮下脂肪中脂联素及其受体基因水平差异，旨在探讨脂联素和 皖南花猪肉质的内在关系。研究重组脂联素对肌内脂肪细胞的作用，探讨脂联素对猪 肉质的影响和作用机制。 1 皖南花猪脂肪组织中脂联素及其受体基因的表达 从皖南花猪繁育中心挑选4 头皖南花猪试验，常规条件下饲养。养至90 d 屠宰， 屠宰前禁食 12 h，采集皮下脂肪组织和肾周脂肪组织，采用相对定量实时荧光PCR 方法检测中脂联素（Adp ）、脂联素受体1 （AdipoR1 ）、脂联素受体2 （AdipoR2 ）mRNA 表达。结果显示： （1）Adp mRNA在皮下脂肪的表达显著高于肾周脂肪 （P0.05 ）；AdipoR1 、 AdipoR2 mRNA在皮下脂肪的表达极显著 （P0.01 ）高于肾周脂肪。 （2 ）皖南花猪皮下脂肪Adp 与AdipoR1 、AdipoR2 显著相关（r = 0.60 ，P0.05 ； r = 0.57 ，P0.05 ）；皖南花猪肾周脂肪Adp 与AdipoR1 、AdipoR2 显著相关（r = 0.31 ， P0.05 ；r=0.37 ，P0.05 ）。 以上结果表明：表明脂肪组织表达Adp 及其受体，皮下脂肪可能是Adp 的主要 来源；且是Adp 调节的主要部位。 2 脂联素对猪肌内脂肪细胞的影响及其机制 挑选5 d 皖南花猪背最长肌组织，分离出实验所需的前体肌内脂肪细胞，到细胞 融合80% 以上，传代继续培养，用不同浓度重组脂联素（recombinant adiponectin，rAdp ） 处理，通过油红O 染色法鉴定，MTT 方法测定细胞活力；利用qRT-PCR 方法测Adp 、 AdipoR2 、AdipoR1 、PPARα 和AMPK mRNA 的表达量。显示，脂肪细胞活力在添加 rAdp 后有降低趋势，2 µg/ml 作用24 h 到达显著差异水平 （P 0.05 ）；rAdp 处理12 h 后，脂肪细胞AdipoR1 和 AdipoR2 mRNA 表达水平显著升高（P 0.05 ），AMPK mRNA 表达量显著下降（P 0.05 ），没有剂量依赖性。用rAdp 处理细胞48 h ，Adp mRNA 表达量显著下降（P 0.05 ），PPARα mRNA 表达量显著升高（P 0.05 ）， 剂量效应不是很明显；AMPK mRNA 表达量在 10 μg/mL rAdp 处理组显著升高（P 0.05 ）。Coumpound C 处理阻断rAdp 处理后导致的AMPK