AT1受体抑制剂对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增殖和凋亡影响.pdf

目 录 一、摘要 中文结构式摘要…………………………………………………………………．．1 英文结构式摘要…………………………………………………………………¨4 二、英文缩略语………………………………………………………………………。8 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………一9 丽舌…………………………………………………………………………………………………………一 材料与方法…………………………………………………………………………10 实验结果…………………………………………………………………………15 讨论…………………………………………………………………………………………………………20 结论…………………………………………………………………………………………………………25 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………26 五、参考文献…………………………………………………………………………27 六、附录 综j苤…………………………………………………………………………………………………………30 在学期间科研成绩………………………………………………………………37 致谢………………………………………………………………………………·38 个人简介…………………………………………………………………………39 ·中文结构式摘要· ATl受体抑制剂对雌激素作用下的子宫内膜癌细胞增 殖和凋亡的影响 刖 罱 无孕激素拮抗的高水平雌激素长期刺激与子宫内膜癌发病关系密切，对于雌 激素诱发子宫内膜癌的机制研究更多围绕其受体依赖作用，而对雌激素非受体依 赖作用研究较少。现有研究证实血管紧张素II受体1(ATl．R)可以激活雌激素受 体(．)的SKBR3乳腺癌细胞系中MAPK的活性，促进乳腺癌细胞增殖，所以我们 推测雌激素是否能够通过ARl．R促进雌激素受体(ER)低表达的子宫内膜细胞增 殖。本研究从子宫内膜癌发病中雌激素的非受体依赖机制这一新方向着手，探讨 雌激素是否能够通过ATl．R而不依赖于ER诱导子宫内膜癌细胞凋亡抑制，从全 新角度研究雌激素在子宫内膜癌发生过程中的分子机制，同时找到拮抗这种分子 机制的方法，渴望能通过控制雌激素非受体依赖性作用，最终抑制细胞周期的进 展，为ER低表达的子宫内膜癌的治疗提供新的理论依据和治疗靶点。 目 的 本实验采用免疫细胞化学方法，MTT法、流式细胞技术及免疫印迹研究子宫 亡的影响。 材料与方法 l、主要材料与仪器 HEC一1A细胞株；胎牛血清；McCoy’s5a培养基；水溶性1713一雌激素；ATl-R V．FITC凋亡检测试剂盒；辣根过氧化酶标记的山羊抗兔IgG；超净工作台；二氧 化碳恒温培养箱：倒置相差显微镜；激光共聚焦显微镜观察；分光光度计；流式 细胞仪；超速低温离心机；电泳仪；转印槽；自动凝胶成像分析仪 2、实验方法 5a培养液中，于37。C、5％c02培养箱中培养，使其贴壁生长。细胞长满 McCoy’s 95％以上后用0．25％胰酶进行消化传代。 中的表达；应用MTT法、流式细胞技术检测雌激素作用于HEC一1A细胞不同时间 后细胞增殖、细胞周期和凋亡的变化，以及saralasin对雌激素诱导下的HEC一1A 细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响；Westernblot分析雌激素作用后HEC．1A细胞 中ERK、p-Akt蛋白表达的影响。 3、统计学分析 采用SPSS13．0软件对数据进行处理，应用方差分析，LSD-t检验进行组间比 较，数据以i±S表示，取P0．05为差异有统计学意义。 结 果 要在细胞核中表达。 2、雌激素及saralasin对HEC．1A细胞增殖的影响 殖作用；在药物作用10min时，saralasin对HEC．1A细胞有明显的抑制作用；在药 物作用各时间段内，ICll82780对HEC．1A细胞均无明显的抑制作用。 3、雌激素及saralasin对H