猪冷冻精液质量影响因素.docVIP

猪冷冻精液质量影响因素 　　摘要： 本文从猪精液冷冻的过程入手，着重分析了精液稀释液中的添加剂，并探索了猪冷冻精液质量的影响因素 关键词：猪冷冻精液；质量；影响因素 中图分类号： S828 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.09.039 人工授精是?F代生物技术的一种，能够充分发挥公畜的遗传潜力，而精液冷冻是人工授精的重要环节，为人工授精提供了精子库。但是，人工授精要保证精液在冷冻之后的受精能力。猪冷冻精液质量受到冷冻前处理、稀释液、冷冻保护剂、解冻等各方面的影响。在冷冻之后，猪冷冻精液的细胞结构很可能发生改变精子的质膜完整性，精子活力和发育能力远远低于鲜活精子，因此猪精液冷冻技术要选用合适的稀释液和糖类，避免精子在冷冻过程主动形成冰晶，进而提高精子的活率，降低冷冻技术对精子质膜和顶体的影响。研究猪冷冻精液质量影响因素不仅能够优化精液冷冻技术，而且对人工授精的发展有着深刻的现实意义 1 精液冷冻的过程 1.1降温 精液在冷冻的过程中需要降温处理，降温主要指精液温度从体温降低到冰点温度。而精液降温需要度过一定的危险温区，降温过程对精子的影响非常大，这种影响被称为低温打击。并且精子在解冻的过程中需要从冰点温度恢复到体温，而这个过程也需要经过危险温区，温度的变化会导致精子的活力下降。具体来说，低温打击会损害精子的代谢功能和精子的细胞膜，因为在降温过程中，精子的细胞膜结构发生了变化。温度降低会导致细胞膜中的磷脂类物质转移到温度较高的地方，精液从结晶状态转为凝胶状态，进而导致细胞膜结构发生变化。在解冻的过程中，磷脂类物质的转移会诱发精子顶体膜与细胞膜的结合，进而改变精子细胞周围的蛋白质环境，影响精子细胞蛋白质的活性。另外，低温打击还会影响精子细胞的其他功能，例如低温打击会损害精子顶体膜，降低细胞膜的通透性 1.2冷冻与细胞损伤 在冷冻精液的过程中，当温度降低到零下5℃时，精子细胞内外的水分处于过冷状态而不会形成结晶。而随着温度的降低，当温度降低到零下10℃时，精子细胞外部的水分会形成结晶，而精子细胞内部的水分也开始固化。而冰晶会产生机械性刺激，损害精子细胞的固有结构。当温度降至在零下5℃～10℃之间时，冰晶会形成在精子细胞外面的电解质当中，细胞内的水分仍处于过冷状态，但是从精子细胞脱水的角度来说，精子冷冻过程中的细胞降温速度必须十分缓慢，允许精子细胞脱水的完全发生，进而避免精子细胞内部水分的固化。速度足够快的精子细胞脱水能够避免精子细胞处于高渗环境，而脱水严重会导致细胞分子的极端收缩，损害精子。另外精子细胞外部水分形成冰晶之后会缩小精子细胞的空间，对精子细胞造成机械性伤害，这种机械性伤害无法弥补。除此之外，在冷冻的过程中需要在精液稀释液中添加冷冻保护物质，避免精子细胞内冰晶的形成。常用的冷冻保护物质是甘油，甘油的渗透性较强，能够降低精子细胞内水分的含量可以渗入到精子细胞内，调节精子细胞由脱水而产生的渗透压变化 2 精液稀释液中的添加剂 为提高精子在冷冻之后的受精能力，相关人员对精子冷冻技术进行了深入研究。在大量的研究中，相关人员发现某些物质可提高精子在冷冻后的运动能力，延长精子解冻后的生存时间，使精子在输卵管内运动，提高授精率，因此在冷冻精子的过程中，技术人员常在精液稀释液中添加能够提高精子活力、延缓精子衰老的物质，这些物质主要包括咖啡因、氨基多糖、己酮可可碱、细胞因子、维生素等 2.1咖啡因 处理精子的过程中，在精液稀释液中加入咖啡因能够有效提高解冻之后，精子的体外受精率和精子的活力。在解冻精子进行体外受精的过程中，需要应用流式细胞仪对精子实行细胞分离，在这个过程中，咖啡因能够有效保证体外受精。因为咖啡因能够抑制精子细胞中的磷酸二酯酶的活性，提高精子内的cAMP浓度，促进精子顶体反应发生，进而实现体外受精。但是，咖啡因会影响受精卵的早期发育，因此在受精卵形成之后需要采用离心方式去掉受精卵中的咖啡因，保证受精卵健康发育 2.2氨基多糖类 一是肝素经常用于诱导动物精子体外获能，肝素与精子结合能够使钙离子进入精子细胞内，进而促进精子的顶体反应，提高精子的受精率；二是透明质酸属于现行大分子多糖物质，能引起动物精子顶体反应和动物精子获能。透明质酸存在于雌性动物的生殖道内，促进体内受精。在处理体外受精的过程中，在精液稀释液中加入透明质酸能够提高精子的存活率 2.3己酮可可碱 己酮可可碱是当前生物技术行业十分重视的精子体外处理剂，能有效增强解冻后的精子活力，改善解冻后质量较差的精子。己酮可可碱在体外受精技术中应用十分广泛，效果较好。己酮可可碱不仅能影响精子的顶体反应和运用能力，而且能刺激精子的运动，使精子在一段时间后仍