温度对萋尔-尼尔氏染色镜检.DOC

温度对萋尔-尼尔氏染色镜检找抗酸杆菌方法的影响 何凤珍 （广东省广州市海珠区新滘人民医院检验科 510300） 摘要： 目的 了解温度对萋-尼氏抗酸杆菌的方法的影响。方法 选择已知阴阳性涂片结果的100例标本进行涂片，一份标本涂5张痰膜片，分别放置25℃（室温）、40℃、60℃、80℃和100℃下予以干燥，并且阴阳性片子间隔排列，干燥后进行萋-尼氏染色、镜检。结果25℃、40℃、60℃和100℃干燥的痰膜片阳性率为50%、80℃干燥的痰膜片阳性率为48%，各温度干燥处理的阳性率没有显著性差异（P0.05）。各温度阳性的分级报告稍不同。各温度阴阳性间隔的阴性片子镜检结果全部与25℃自然干燥镜检结果相符，没有产生标本间交叉污染，也没有产生痰膜脱落的后果。结论 25℃-100℃干燥痰膜片对萋-尼氏染色找抗酸杆菌的方法影响不大，只要控制好干燥的时间可提高工作效率，减轻工作量。 关键词：抗酸杆菌、涂片、温度、萋-尼氏染色 随着HIV的流行，以及耐药结核患者的增多，我国的结核病控制工作不可忽视，而痰涂片镜检作为发现传染源，确定诊断和化疗方案，考核疗效、评价防治效果的方法之一，因其具有简便、快速、特异性高、价廉等优点而在我国防痨单位普及使用[1]，但南方天气潮湿，痰膜片很难自然干燥并影响我们的工作效率，因此，我们通过测试几种温度干燥痰膜片的实验去了解温度对涂片镜检的影响，并希望能使用较高的温度去缩短痰膜干燥的过程，从而提高工作效率。 材料与方法 1、标本来源：2008来我院就诊或住院的已知涂片结果的患者送检痰液100份 2、仪器与试剂 （1）奥林巴斯X21型光学显微镜 （2）东方Ⅰ型干燥箱。 （3）染液，萋尔-尼尔逊氏（Z-N）染液，0.8%碱性复红染液、5%盐酸乙醇脱色液、0.06%的亚甲兰复染液均按结核病诊断，实验室检验规程[2]配置。试剂均为分析纯。 3、实验方法： 3.1 选择已知涂片结果的100份合格痰标本，阴阳性各50份，同一份标本涂片5张，分别在25℃（室温）、40℃、予以干燥。 3.2 在标本放置序列上均采取阳性与阴性样本间隔排列 3.3 痰膜片干燥后，25℃、40℃干燥的片子火焰固定，滴加碳酸复红，盖满痰膜，火焰加热到出现蒸汽后，脱离火焰，保持染色5min，60℃、80℃、100℃干燥的痰膜片干燥后马上取出直接滴加石碳酸复红，盖满痰膜，保持染色5分钟。 3.4 其它染色步骤均按结核病诊断实验室检验规程[2]进行5%盐乙醇脱色及复染0.06%的亚甲兰复染液。 3.5 染好的痰膜片自然干燥后，进行镜检（目镜10×，物镜40×）并进行镜检结果的分级报告[2]。 4、统计学分析：所有数据用SPSS 11.0软件进行分析处理。 结果 1、40℃、60℃、80℃、100℃干燥的镜检阳性率与25℃（室温）干燥的阳性率结果相比较；用5种不同的温度对100份病人痰标本涂片进行干燥、染色镜检，并采用盲法进行结果判断。 25℃（室温）干燥的痰膜片阳性率50%（50/100），40℃干燥的阳性率50%（50/100），60℃干燥的阳性率50%（50/100），80℃干燥的阳性率48%（48/100），100℃干燥的阳性率50%（50/100）, 25℃、40℃、60℃、80℃、100℃五种温度的阳性率比较没有显著差异（X2=0,P0.05））））） 阴性率 阳性率 合计 阳性率 0-8条/300视野 1+ 2+ 3+ 4+ 25℃（室温） 50 0 16 18 8 8 100 50% 40℃ 50 0 20 12 10 8 100 50% 60℃ 50 6 6 17 13 8 100 50% 80℃ 52 0 12 16 8 12 100 48% 100℃ 50 3 9 16 12 10 100 50% 合计 252 9 63 79 51 46 500 　 2、25℃、40℃、60℃、80℃、100℃五种温度的阴性与阳性分级（0-8条/300视野、1+、2+、3+、4+）没有显著性差异（X2=26.5,P0.05））—29 王苏民、刘宇红、姜广路等，我国痰涂片镜检质量控制状况分析与评价[J] 中国防痨杂志，2000，22（4）：209—210 梁庆福、陈求扬、邱志强、王玮、林勇明，痰涂片抗酸染色质量对镜检结果的影响[J] 海峡预防医学杂志 2003，104 7