高效液相色谱和毛细管电泳分离荧光检测小分子氨基生物物质的进展.pdfVIP

2010 年 2 月 第 26 拳第 1 期 分析科学学.IJ.. Vo l. 26 No. l JOURNAL OF A!J ALYTI(、AL SC IE !JCE Feb. 20 10 001 编码: 10.396日jj. issn. 1006-6144. 20 10.01. 026 一 述 综 约 特 高效液相色谱和毛细管电泳分离荧光检测 小分子氨基生物物质的进展 邓樱花I 气王红\张华山锯1 (1.武汉大学化学与分子科学学院，湖北武汉 430072; 2. 湖北第二师范学院化学与生命科学系，湖北武汉 43020日 摘 要:综述了 2003 年以来，采用高效液相色谱(HPLC) 和是，知管电泳(CE)分离，荧 光检测神经递质氨基政、确政化，氨基政、脱罪幸族和生物族等小分子氨基生物物质的分析 方法进展。对上述氨基生物物Jti 测定方法的前亲进行1A豆望。引用文献 52 篇. 关键词z 氨基生物物质;HPLC， CE; 荧光检测s 综述， 中圈分类号=臼57. 7飞 文献标识码，A 文章编号: 1∞6-6144(2ο10)01-0103-06 1 前言 复杂体系中生物物质的分离测定已成为生命科学领域的重要任务.其中，离效液相色谱(HPLC) 和 毛细管电泳(CE)是两种簸有效的分离技术，具有准确、灵敏、快速和自动等特点。 HPLC 和 CE 的检测方 法主要包括有紫外/可见吸收、荧光/激光诱导荧光、化学发光、电化学、质谱等。激光诱导荧光(LlF) 检测 与 CE 结合是灵敏度毅高的方法之一，是目前生物体中超痕最生物活性物质测定的强有力手段. 氨基生物物质广泛存在于自然界.生物样品中小到氨基酸和生物胶.大到蛋白质无不含有丰富的氨 基，而且它们在生命过程中均起着重要作用.因此，氨基生物物质的商灵敏检测显得十分重要。除了少量 带芳香环外，由于许多氨基化合物本身不具有生色团.必须用化学衍生的办法使其具有灵敏的荧光信号， 所以往前衍生技术与 HPLC 及 CE 相结合，采用荧光检测或激光诱导荧光检测，已成为高灵敏度、高选撑 住测定生物氨基化合物的研究热点.本文对近儿年采用 HPLC 和 CE 分离、荧光俭测或激光诱导荧光检 测氨基生物物质的分析方法进行评述. 2 棉经递质氨基酸 氨基辛酸是人类生命延续过程必须摄取的成分.是生命科学中重点研究的对象之一.氨基酸的种类很 多，各种氨基酸在生物体内具有不同的生物功能，如中性氨基酸沪氨基丁酸、甘氨酸、(1-芮氨酸等对中枢神 经元表现出抑制作用，而酸性氨基酸谷氨酸、天冬氨酸则表现为兴奋作用. 这类在中枢的突触传递中起递 质作用的氨基酸称为神经递质氨基酸l lJ • 神经递质氨基酸主要包括谷氨酸(Glu) 、天冬氨酸(Asp) 、 r-氨基丁酸GABA) 、甘氨酸(Gly) 、p丙氨 酸({1-Ala) 、牛磺酸(Tau)等. 临床医学中许多神经性和精神性疾病都表现为氨基酸神经递质含量异常，如 癫癫病、柏金森病、脑缺血、阿尔茨海默病等.这类氨基酸主要存在与脑组织、脑脊液、细胞、血液和唾液 中，含量一般在 fmol-zmol.样品组成复杂，且含有多种化学性质相似的氨基酸组分，分析过程中检测方 法的灵敏度对分析的准确性起着非常重要的作用. 2. 1 高效液徊色清法 Ji 等问采用 HPLC分离荧光检测了七种神经递质氨基激与邻苯二甲自主OPA) 反应 1 min 后的衍生 敏稿日摘自 : 2009-08-11