分光光度法测定乳和乳制品中蛋白质的含量.pdfVIP

第 29 卷第 3 期 河南工业大学学报(自然科学版) Vo l. 29 , No. 3 2008 年 6 月 Journal of Henan University of Technology( Natural Science Edition) Jun.2008 文章编号:1673-2383(2008)03-0008一 04 分光光度法测定乳和乳制品中蛋白质的含量 路纯明，黄瑞瑞 (河南工业大学化学化工学院，河南郑州 450052) 摘要:用双缩腺法测定牛奶和酸奶中蛋白质含量.采用正支实验优化了删定条件，λma. = 536 2 nm ，双缩月乐加入量 4 mL ,pH = 13. 55 , Cu + 浓度 =0.008 moνL ，室温下放直 15 min 后测定; 线形方程相关系数T = 0.999 1 ，摩尔吸收系数 K=2.61 xl04 U(mol. cm) ，回收率在 97.2% -103.9% ，平均变异系数 CV=O. 83% ，线形范围 0.016 - 2 mglmL.该法精密度好，抗干扰能 力强，快速、简便，可直接测定牛奶和奶制品中蛋白质. 关键词:光度法;双缩腺法;蛋白质;测定 中图分类号:TS20 1. 2 文献标识码:B 上海生物化学研究所监制- 0 前言 1.2 仪器 722N 可见光分光光度计:上海精密科学仪器 蛋白质是一切生命的物质基础，是肌体细胞 有限公司;pHS-25 数显 pH 计:上海精密科学仪 的重要组成部分.作为人体最重要的营养素之 器有限公司;UV - 260 紫外可见分光光度计:日 一[门，其分离与定性、定量分析是药学和生命科 本岛津. 学研究中经常涉及的重要内容，是生物化学和其 1.3 试剂 他生物学科、食品检验、临床检验、诊断疾病[2] 、 盐酸，氢氧化锅，酒石酸饵锅，腆化饵，硫酸 生物药物分离提纯和质量检验中最重要的工作. 铜，四氯化碳，以上试剂均为分析纯. 目前用分光光度计测定蛋白质含量的方法有多 1.4 方法 种[3] ，如双缩服法[时]、 Folin -酣试剂法、考马斯 1. 4.1 试剂的配制 亮蓝染色法[6] 、紫外吸收法[7] 等. 标准蛋白质洛液:用低相对分子质量标准蛋 笔者通过单因素条件试验和正交实验，找出 白质配制成 10 mglmL 的标准蛋白质溶液;双缩 蛋白质发生双缩服反应的最佳条件，并用双缩腮 服试剂:称 1.20 g 硫酸铜(CuS0 .5H 0) 和 6.0 4 2 法对牛奶及其制品进行蛋白质含量的测定.样品 g 酒石酸饵纳(KNaC H 0 • 4H 0) ，用 500 mL 4 4 6 2 测定结果表明，该方法有较好的精密度，线性关系