高效液相色谱法测定复方益母胶囊中阿魏酸的含量论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定复方益母胶囊中阿魏酸的含量论文 .freel,流速为1.0 mL/min。结果 阿魏酸在0.8～13 μg/mL范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 99,n＝6),平均回收率为103.0%(RSD＝0.4%,n＝5)。结论 本法简单可行,准确度高,重现性好,回收率高,能有效控制复方益母胶囊的质量。 【关键词】 复方益母胶囊 阿魏酸 高效液相色谱法 Abstract：Objective To estblish a HPLC method for content determination of ferulic acid in pound prescribe Mothern ZORBAXSB-C18 obile phase, and detective , the floL/min. Result otherplicity超纯水器；超声波清洗器(型号CX-250,功率250 etler-AE240型 梅特勒-托利多(上海)有限公司。 乙腈(色谱纯,批号031123,Fisher),水为超纯水,其它试剂均为分析纯。阿魏酸对照品(购自中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号773-9910)；复方益母草胶囊由开封市民康制药厂提供(批号040201,040202,040203,040204,040205, 040206,040207,040208,040209,040210)。 2 色谱条件 色谱柱：ZORBAXSB-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液(12︰88)；检测波长：316 nm；流速：1.0 mL/min。 3 方法和结果 3.1 对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品2.04 mg到100 mL量瓶中,稀释至刻度,制成阿魏酸对照品贮备液。 3.2 提取方法的选择 根据阿魏酸的化学性质,考察回流和超声两种提取方法。取本品内容物(批号040201)约1.6 g,2份,精密称定,分别精密加入甲醇30 mL,称定重量,分别回流提取、超声处理30 min后,补足失重,滤过,取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述2种供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件依法测定。结果表明,超声处理率最好,且该法操作简单,故确定采用超声方法提取。 3.3 溶剂种类的选择 取本品内容物(批号040201)约1.6 g,3份,精密称定,分别精密加入50%甲醇、70%甲醇、甲醇各30 mL,密塞,称定重量,超声处理30 min,取出,放冷,再称定重量,分别用相应溶剂补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件依法测定。结果表明,以70%甲醇为溶剂,阿魏酸的提取效率最好,故确定提取溶剂为70%甲醇。 3.4 提取时间的选择 取本品内容物(批号040201)约1.6 g,3份,精密称定,分别置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇30 mL,密塞,称定重量,分别超声处理30、45、60 min,取出,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件依法测定,结果表明,超声处理45 min即可提取完全。 3.5 溶剂用量的考察 取本品内容物(批号040201)约1.6 g,3份,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入70%甲醇(20、30、50 mL),密塞,称定重量,超声处理45 min,取出,放冷,再称定重量,分别用相应溶剂补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件依法测定,结果表明,30 mL溶剂即可将阿魏酸提取完全。 3.6 供试品溶液的制备 取本品内容物1.6 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇30 mL,密塞,称定重量,超声(功率250 in,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 3.7 空白试验 取益母草加水煎煮2次,第1次2 h,第2次1 h,合并煎液,滤过,滤液浓缩成清膏；除当归、川芎外其余一味木香,用50%乙醇回流提取2 h,滤过,滤液回收乙醇后与上述清膏合并,浓缩成稠膏状,加蔗糖及乙醇适量,制成颗粒,整粒,装胶囊,即得空白对照品,并按供试品溶液制备方法制得空白溶液。精密量取阿魏酸贮备液1 mL,置50 mL量瓶中,用10%乙醇稀释到刻度,制成对照品溶液。分别精密吸取上述2种溶液10 μL,注入液相色谱仪,测定,记录色谱图,结果见图1。试验结果表明,空白无干扰。 3.8 线性关系考察 精