栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测.pdfVIP

栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测.pdf

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栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) # 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒单克隆抗体的制备 及!#$% 检测 , 付崇罗# $ 宋微波# 李 !# 朱明壮# # (中国海洋大学 海水养殖教育部重点实验室 青岛 $::%%4 ) $ 聊城大学生命科学学院 聊城 ) ( $$%2 摘 要:利用蔗糖密度梯度离心技术从自然发病的栉孔扇贝 ( )组织分离纯化急性病毒性坏死症 !#$%’ ( $)))*)+ ( , )病毒,并以此为抗原免疫 小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与 骨髓瘤细 JD.I+ K-.@ A+D-’,’ID E@+/@+ J1L M/(,7 D 1N;# 胞进行融合,最终筛选出 株能稳定传代并分泌该病毒特异性单克隆抗体( , )的杂交瘤细胞 ! O’A’D(’A/( JAI,’E0 OJ, 系。应用胶体金标记免疫电镜技术在超微水平上对这 株 进行测定表明,它们对 病毒均具有高度的 ! OJ,@ J1L 特异性,并且所识别的特异性位点均位于病毒粒子囊膜的纤突上。应用该单克隆抗体对不同养殖季节的一龄贝进 行间接 检测发现,月中旬至 月底病毒感染率与感染强度均处于当年的最高峰,与这一时期栉孔扇贝所表 PQNJ 3 3 现出的最高死亡率完全吻合。 关键词:栉孔扇贝, 病毒,单克隆抗体, J1L PQNJ 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) N2: J %%%#;:$%2 $%% %#;%##:;% 自 世纪 年代起,连续爆发的养殖栉孔扇 全佐剂、 培养基、 和 均购自 $% 2% RUOQ#:!% TJ6 T6 5,D’ 贝( )大规模死亡现象给我国的扇贝 公司;酶标仪为 , 。 !#$%’ ( $)))*)+ P/,@0@I+=@ O.I@Y/A OZ4

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