食品中细菌菌落总数的测定资料.ppt

4、若所有稀释度平板菌落数均30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数计算。 5、若所有稀释度平板均无菌落生长，则应按1乘以最低稀释倍数计算。 试样例次 稀释度 选定计数稀释度 菌量/(个/g或mL) 10-2 10-3 10-4 1 平均菌落数 380 52 18 10-3 5.2x104 2 526 205 32 10-3，10-4 2.6x105 3 271 60 12 10-2 2.7x104 4 284 152 37 10-2，10-3 9.0x104 5 26 12 5 10-2 2.6x103 6 无法计数 568 312 10-4 3.1x106 6、若所有稀释度均不在30～300之间，有的300，有的又30，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 （四）?菌落计数报告方法 1、菌落数在1～100时，按四舍五入报告两位有效数字。 2、菌落数≥ 100时，第三位数字按四舍五入计算，取前面两位有效数字，为了缩短数字后面的零数，也可以10的指数表示。 3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 4、 若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。 5、称重取样以CFU/g 为单位报告，体积取样以CFU/mL 为单位报告。 注意事项 1、无菌操作 操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。 2、采样的代表性 如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。 3、稀释液 样品稀释液主要是灭菌生理盐水，或磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。 4、每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。 5、倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝固而不能与菌液充分混匀。如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。 6、倾注培养基的量规定不一，从12～20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。 7、为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min，以防止细菌有所死亡或繁殖。 8、培养温度一般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，故多采用30℃）。培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后，培养基失重不应超过15％。 9、为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板，不经培养，而于4℃环境中放置，以便计数时作对照观察。 　 六、?结果 1、?将实验测出的样品数据以表格的方式报告。  2?、对样品菌落总数作出是否符合卫生要求的结论。 报告方式 样品 稀释液及 菌落数 选择稀释度 报告(CFU/g,ml) 10-2 10-3 10-4 样品名称 原始数据 计算公式 报告 平均 七、思考 1、?什么是细菌菌落总数（cfu）？2、细菌菌落总数测定的卫生学意义是什么？ 3、倒培养基后，为什么要倒置培养？ 4、为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在46±1℃的温度？ 酱油（GB/T2717-2003）： 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL 大肠菌群： ≤30MPN/100mL 肠道致病菌： 不得检出 全脂奶粉、脱脂奶粉（GB5410-1999）： 特级 一级 二级 细菌菌落总数：≤20000 ≤30000 ≤50000 （CFU/ml） 大肠菌群 ≤40 ≤90 ≤90 （MPN/100g） 肠道致病菌： 不得检出 不得检出 不得检出 巴氏杀菌乳