糖醇类物质对人肝细胞低温保存的影响.pdfVIP

第33卷 第3期 制冷 学报 f．33．No．3 三!垒垒旦 JournalofRefrigeration June．2012 文章编号：0253-4339(2012)03—0062—04 doi：10．3969~．issn．0253—4339．2012．03．062 糖醇类物质对人肝细胞低温保存的影响 杨波 沈 力 黄丹华 刘宝林 (上海理工大学医疗器械与食品学院 上海 200093) 摘 要 将传统肝细胞冻存保护剂配方中的DMSO的浓度减为5％，并添加不同浓度的D-山梨醇、木糖醇或麦芽糖醇， 置于一80℃的冰箱冻存两周，两周后将细胞快速复温，进行细胞存活率、24h贴壁率以及细胞形态学的检测，并与1O％ 浓度DMSO组对照比较。结果表明，D一山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇均对人肝细胞的低温保存有一定的保护作用，其中 5％DMSO+0．4M D．山梨醇组复温后细胞的存活率、贴壁率均优于其他冻存液组，D．山梨醇与DMSO联合使用降低了冻存保 护~UDMSO的浓度，表明两者有协同作用。 关键词 医学细胞生物学；低温保存；肝细胞；糖醇；二 甲基亚砜 中图分类号：Q813．1；TB69 文献标识码：A Cry0preserVati0nofHumanHepatocytebySugar—alcoholbasedCPAs YangBo ShenLi HuangDanhua LiuBaolin (Schoolofmedicalinstrumentandfoodengineering，UniversityofShanghaiforSci．Tech．Shanghai，200093， China) AbstractDifferenttypesofsugaralcoholisusuallyusedascryoprotectiveagents(CPAs)topreservehumanhepatocytes．Inthis study，anewytpesofsugaralcoholbasedCPAswithlow toxiciyt wasexploredbyreplacingMe2SOwithD—sorbicalcohol，xylosic alcoholandmalto1．TheMe2SO concentrationinCPAswasreducedto5％．Humanhepatocytes~tachedtoplasticcoverslipswere treatedwiththeaboveCPAsandthenplacedinthefridgeat一80~C fortwoweeks．Thesurvivalrate，24hcelldetachmentandcell morphologyweretestedandcomparedwiht theresultsusing 10％ Me2SO asCPAs．Theresultsshow that5％ Me2SO withD—sorbic alcoholgivesthebestresults．ItisconcludedthatthenewCPAsareeffectivetohumanhepatocytescryopreservation． KeywordsMedicalcellularbiology；Cryopreservation；Hepatocyte；Sugar—alcohol；Dimethyl—sulfoxide(Me2SO) 肝细胞是进行生物人工肝和肝细胞移植研究 用 。多元糖醇具有与醇相似的化学和物理性质，同 的重要细胞材料 。近年来，随着生物人工肝和肝 时又是糖的衍生物，兼具糖和醇两方面的特性 。例 细胞移植研究的开展，对肝细胞的需求不断增加， 如木糖醇不仅具有和甘油相似 的性质吸湿性 ，而 迫切需要有效的肝细胞长期保存方法 以促进生物人 且在人体 中应用能增加肝糖元，起到护肝保肝作