王镜岩-生物化学I-第9章酶促反应动力学—第10章酶的作用机制和酶的调节教程.ppt

Km 变大，Vmax不变 2.非竞争性抑制 截距 V下降发生抑制 Km不变 亲和力不受影响 Vmax减小 部分酶始终失活 Km不变，Vmax变小 3. 反竞争性抑制作用 Km、Vmax都变小 上图反映出温度如何影响酶活力？ 产物累积量 相对酶活％ 最适温度 最适温度 动物酶 35~40℃ 植物酶 40~50℃ 微生物 大部分 40~50℃ 个别高温菌 90℃以上 四、温度对酶反应的影响 温度越高，活化分子越多，反应速度快； 酶变性时间越短，反应速度下降也迅速。 五、pH 对酶反应的影响 最适pH时的酶活力最大 最适pH因酶而异，多数酶在7.0左右 是酶的特性之一 六、激活剂对酶反应的影响 ①无机离子 阳离子 K+、Ca2+、Na+、Mg2+、Zn2+等 阴离子 Cl -、Br -等 ②中等大小的有机分子 ③某些激酶 第十章 酶的作用机制和酶的调节 一、酶的活性部位 二、酶催化反应的独特性质 三、影响酶催化效率的有关因素 四、酶催化反应机制的实例 五、酶活性的调节控制 六、同工酶 一、酶的活性部位 活性中心：酶分子中结合底物并起催化作用的少数氨基酸残基，包括底物结合部位（决定酶的专一性）、催化部位（决定酶所催化反应的性质）。 频率最高的活性中心的氨基酸残基：Ser、His、Cys、Tyr、Asp、Glu、Lys。 不需要辅酶的酶：活性中心是酶分子在三维结构上比较靠近的少数几个氨基酸残基或是这些残基的某些基团。 需要辅酶的酶：辅酶分子或辅酶分子的某一部分结构往往就是活性中心的组成部分。? （一）酶活性部位的特点 接触残基：R1、R2、R6、R8、R9、R163 辅助残基：R3、R4、R5、R164、R165 结构残基：R10、R162、R169 非贡献残基：其它 酶蛋白 必需残基 非必需残基 活性中心 活性中心外 接触残基 辅助残基 结构残基 结合残基 催化基团 （1）接触残基：结合基团，催化基团。 （2）辅助残基：不与底物接触，辅助酶与底物结合，协助接触残基。 上述两类残基构成酶活性中心。 （3）结构残基：维持酶分子三维构象，与酶活性相关，但不在酶活性中心范围内，属于酶活性中心以外的必需残基。 上述三类残基统称酶的必需基团 （4）非贡献残基（非必需基团） 可能在免疫，酶活性调节，运输转移，防止降解等方面起作用。 酶活性部位的特点： （1）活性部位在酶分子的总体中只占相当小的部分，往往只占整个酶分子体积的1%-2% ； （2）酶的活性部位是一个三维实体，具有三维空间结构。 活性中心的空间构象不是刚性的，在与底物接触时表现出一定的柔性和运动性。（邹承鲁研究酶变性的工作） （3）通过诱导契合酶和底物结合； （4）酶的活性部位是位于酶表面的一个裂隙内，裂隙内是一个相当疏水的环境，从而有利于同底物的结合； （5）底物通过次级键较弱的力结合到酶上。 （二）研究酶活性部位的方法 （1）通过酶的专一性：研究酶的专一性底物的结构特点、酶的竞争性抑制剂结构特点等。 （2）酶的化学修饰法：例如1.用共价修饰的试剂作用于酶，查明保持酶活力的必需基团；2.亲和标记（合成底物类似物）；3.—SH保护剂的使用。 （3）X射线晶体衍射法 （4）分子生物学的方法 二、酶催化反应的独特性质 （1）酶反应分为两类：仅涉及电子转移和涉及电子和质子两者或者其他基团的转移。 （2）催化作用是以氨基酸侧链上的功能基团和辅酶为媒介。 （3）酶催化反应的最适pH范围通常狭小。 （4）酶分子很大，而活性部位通常只比底物稍大一些，一个巨大的酶结构对稳定活性部位的构象是必要的。 （5）酶具有复杂的折叠结构。 三、影响酶催化效率的有关因素 （一）底物和酶的邻近效应与定向效应 邻近效应：酶与底物形成中间复合物后使底物之间、酶的催化基团与底物之间相互靠近，提高了反应基团的有效浓度。 定向效应：由于酶的构象作用，底物的反应基团之间、酶与底物的反应基团之间正确取向的效应。 酶把底物分子从溶液中富集出来，使它们固定在活性中心附近，反应基团相互邻近，同时使反应基团的分子轨道以正确方位相互交叠，反应易于发生。 邻近效应与定向效应对反应速度的影响： ①使底物浓度在活性中心附近很高 ? ②酶对底物分子的电子轨道具有导向作用 ? ③酶使分子间反应转变成分子内反应 ④邻近效应和定向效应对底物起固定作用 胆碱乙酰化酶 胆碱酯酶 胆碱 乙酰胆碱 积累导致神经中毒症状 如何紧急救治？ 排毒 洗胃、喝鸡蛋清牛奶 导泄、利尿