在测量波长下（λ max ）测定吸光度.PPT

第31、32课时 教学内容 第31,32学时教学内容 教学要求 教学重点及难点 概述 分光光度法的特点： 表9-1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 电子能级间跃迁 吸收曲线的讨论： 9.1.5 光的吸收基本定律 ──朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律 朗伯—比耳定律数学表达式 2. 摩尔吸收系数κ的讨论 9.1.7 偏离比耳定律的原因 1. 物理性因素： 2. 化学性因素 课后作业 本节课程到此已全部结束！ 朗伯—比耳定律是建立在所有的吸光质点之间不发生相互作用的前提下的，当溶液浓度较高（c 10 -2 mol ·L-1）时，吸光质点间分子或离子的平均距离减小，就会发生相互作用而改变吸光质点的电荷分布，改变它们对光的吸收能力，即改变吸光质点的摩尔吸光系数，浓度越大，这种影响就越显著。 朗伯—比耳定律只适用于稀溶液(c10-2 mol ·L-1) 。 ① 溶液浓度过高引起对朗伯—比耳定律的偏离 * 教学要求　 教学重点 　 教学难点 　 课后作业 　 titrimetric analysis §9.1 吸光光度法基本原理 一　掌握朗伯—比耳定律的定义和数学表达式,掌握偏离朗伯—比耳定律的原因。 二　掌握摩尔吸收系数κ定义和计算 教学重点： 教学难点 ： 摩尔吸收系数κ定义 朗伯—比耳定律 偏离比耳定律的原因 朗伯—比耳定律 吸光光度法：基于物质对光的选择性吸收而建立的一种仪器分析方法。 包括：比色法、可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法等。 第九章 吸光光度法 常用的分光光度法有两种，即：紫外分光光度法、可见分光光度法。 自然界中许多物质有颜色，如：硫酸铜水溶液—蓝色；高锰酸钾水溶液—紫红色等。 有色溶液颜色深浅和它的浓度成正比关系。 通过比较颜色的深浅就可以判断出它们的浓度，这种方法称之为比色分析法。 通过人的眼睛比较溶液颜色的深浅以确定溶液浓度的方法称之为目视比色法。 采用分光光度计代替人眼比较溶液颜色来确定溶液浓度的方法称之为分光光度法。 (1) 灵敏度高，适用于微量组分的测定，通常所测 试液的浓度下限达10-5~10-6 mol·L-1。如果事先富集，还可更低。催化分光光度法可达10-８mol·L-1。 (2) 准确度较高，分光光度法的相对误差为2%~5%。若使用高级仪器，误差可降至1%~2%。 (3) 仪器设备简单，操作简便、快速。 (4) 选择性好，很多物质可不经分离可直接测定。 (5)应用广泛，几乎所有的无机物质和许多有机物质都能用此法进行直接或间接的测定，不仅用于定量、还可用于定性分析及化学平衡的研究等。 §9.1 吸光光度法基本原理 9.1.1 光的基本性质 光是一种电磁波，它具有波粒二象性，光具有一定的能量。 普朗克方程： E = hν = hc/λ 可见，不同波长的光具有不同的能量 人眼能够感觉到的是波长范围在400～750nm的光，称之为可见光（见书P241表9-1）。 将各种可见光按一定的比例混合，就得到白光（复合光），如：日光、白炽灯光等 光分为单色光、复合光　 Ultraviolet－Visible Spectrophotometry 10-1 1 10 102 400 760 103 104 105 106 107 108 比色及可见光度法 外层电子 可见光 X－射线光谱法 内层电子 X－射线 微波光谱法 红外光谱法 紫外光度法 分析方法 分子转动 分子振动或转动 中层、外层电子 跃迁类型 微波 红外光 紫外光 光谱名称 波长/nm 2. 电磁波谱图 　全透过－无色（如水）； 　部分吸收－显示透过光的颜色 9.1.2 物质产生颜色的原因 物质的颜色与光有关系 (1) 不透明的物质 全吸收→黑色；全反射→白色； 部分吸收→反射光的颜色（黄桌子 →吸蓝） (2) 透明物质：看到透过光的颜色 以CuSO4水溶液为例，在正常光线下CuSO4水溶液为蓝色溶液，这是什么原因哪？ 自然光为复合光，照射到CuSO4水溶液时， CuSO4水溶液对自然光里的黄色光进行了选择性的吸收，蓝色光不吸收，使其透过，表现出的是透过光的颜色。 蓝色光和黄色光为互补色光，二者按一定比例混合可以成为白光。 结论：物质产生颜色的原因是 对不同的光进行选择性的吸收而造成的。 9.1.3 物质对光选择性吸收的本质