血常规复检镜检标准操作程序.docVIP

血常规复检、镜检标准操作程序 目的 用于指导血常规复检、镜检。 该SOP的变动程序 标准操作程序的变动可由任一是用本程序的工作人员提出并报经下述人员批准签字： 专业主管、科主任。 血常规复检、镜检标准 WBC小于3.0×109或大于15×109；100fl-150fl出现高尖峰； PLT小于60×109； Hb小于50g/L； 特殊病人和特殊病情； 必须复查，必须推血片镜检； 并登记。 操作程序 1.由本科工作人员重新采血。 1.立即测定室内质控，观测结果是非在控，在控，则再次测定，确认。并手工计数，参照相关手工计数操作程序。 结果不在控，查找原因，排除后，则再测室内质控测定。在控确认，则再次测定。确认。并手工计数，参照相关手工计数操作程序。 涂片染色镜检。 白细胞手工计数 标本种类：新抽取的凝血或手指末梢血标本要求：抗凝剂采用EDTA K2抗凝。 用手指末梢血作白细胞检验时，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。 标本储存取材后应立即推制成血涂片，并尽快送检。 标本运输保持干燥，室温运输。ml 蒸馏水 98ml 操作步骤 1 . 用吸管准确吸取末梢血20ul（WBC小于3.0×109吸取40 ul）；拭去管尖外部的余血,将吸管插入小试管中稀释液的底部,轻轻将血放出,并吸取上层清液,洗试管数次,最后混合. 2. 充池,静置2-3分钟,待白细胞下沉. 3. 用低倍镜计数4角4个大方格内的白细胞数. 计算 白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数×50×106 参考范围 成人:(4-10)×109/L 儿童:(5-12)×109/L 新生儿:(15-20)×109/L 注意事项 1.标本采集时不能挤压过甚,针刺深度必须适当. 2．大小方格内压线细胞应按数上不数下,数左不数右的原则进行计数. 3．稀释液要过滤,小试管,计数板必须清洁,以免杂质,微粒等误认为细胞. 4. 计数时,两次重复计数误差不得超过10%. 涂片染色检查。 方法学原理 用瑞氏染色法，对制备好的血涂片进行染色，然后在显微镜下进行形态检查。 实验材料瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。 实验仪器显微镜操作步骤瑞氏染色：将制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。 高倍镜（必要时油镜）观察细胞形态。 结果判断与分析 红细胞形态在良好的染色血涂片上，正常红细胞的大小形态较为一致直径为6.7～7.7μm，染色淡红色，中央着色较边缘淡。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化，导致某些类型贫血的红细胞产生特殊的形态变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。红细胞的形态变化主要表现在以下四个方面： 红细胞大小改变 1小红细胞（microcyte）直径小于6μm者称为小红细胞，正常人遇见。如果血涂片中出现较多染色过浅的小红细胞，提示血红蛋白合成障碍，可能由于缺铁引起；或者是珠蛋白代谢异常引起的血红蛋白病。而遗传性球形细胞增多症的小红细胞，其血红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区消失。 2大红细胞（macrocyte）直径大于10μm。见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血。 3巨红细胞（megalocyte）直径大于15μm。最常见于缺乏叶酸及维生素B12所致的巨幼细胞性贫血。其胞体所以增大是因为缺乏上述因子时，幼稚红细胞内DNA合成不足，不能按时分裂所致如果血涂片中同时存在分叶过多的中性粒细胞则巨幼细胞性贫血可能性更大。 4. 红细胞大小不均（anisocytosis）是指红细胞之间直径相差一倍以上而言。常见于严重的增生性贫血血涂片中。而巨细胞性贫血时尤为明显，可能与骨髓粗制滥造红细胞有关。 红细胞形态改变 1球形红细胞（spherocyte）细胞直径小于正常。厚度增加常大于2μm。无中心浅染色区，似球形。常见于遗传性球形细胞增多症和伴有球形细胞多的其它溶血性贫血。如自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病以及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等。 2椭圆形红细胞（elliptocyte）细胞呈卵圆形、杆形、长度可大于宽度3-4倍，最大直径可达12.5μm，横径可为2.5μm。此种红细胞置于高渗、等渗、低渗溶液或正常人血清内，其椭圆形保持不变，但幼红细胞及网织红细胞均不呈椭圆形。在遗传性椭圆形细胞增多症病有血涂片中此种红细胞可达25%，甚至高达75%（正常人约占1%）。 3靶形红细胞（target cell）红细胞中心部