第2次课天然药物的与开发汇总.pptVIP

结果，石油醚提取物示有明显体外灭囊活性。TLC检查示含有十几种酚性成分。将石油醚提取物随用不同碱液作pH梯度萃取，由NaHCO3萃取部分分到有效单体鹤草酚，最后经一系列化学降解及光谱测试，确定结构如图所示，并经化学全合成得到确认。 ? 鹤草酚（Agrimonophol） 紫杉醇的发现： 1971年：提取分离，结构确定，活性确认 1975-76年：在多种瘤株上实验有效； 1977年：临床前研究； 1979年：作用机理探明； 1982年：Ⅰ期临床实验； 1985-86年：Ⅱ期临床实验(卵巢癌)； 1986年：紫杉醇侧链的全合成； 1988年：紫杉醇半合成； 1990-93年：侧链合成方法的改进； 1992年：FDA批准； 1994年：首次全合成。 喜树碱的发现： 茜草根中抗肿瘤活性成分的追踪分离： 茜草根的抗肿瘤活性系采用S-180荷瘤小鼠进行体内抑瘤试验筛选过程中发现的。通过活性成分的追踪分离；最后得到了具有抗肿瘤活性的RA-5及RA-7等环肽类活性物质。 分离过程中，活性测试系在接种了p-388白血病瘤细胞的CDFl系小鼠身上进行。每个小鼠接种的瘤细胞数为1?106。抑瘤活性以给药组动物平均存活天数（T）相对于对照组动物平均存活天数（C）的百分率，即延命效果（T/C）表示。T/C125％时始认为有活性。 各个分离部分或馏分的活性筛选均按等剂量原则进行。甲醇、苯、乙酸乙酯及水提取物均按200 mg/kg小鼠剂量进行投药，但从苯提取物出发分离得到的各个组分，以苯提取物数量为100时各个馏分的收率为Y，按200 ? (Y/100) mg/kg小鼠剂量投药。故实际上各个组分（子体）的投药剂量与苯提取物（母体）投药量相当，测得的活性强弱有定量比较意义。 投药方法均为腹腔注射，每日1次，从植入肿瘤细胞后次日起连续进行5天。 说明： （六）天然药物中生物活性成分研究需要注意的几个问题: 创新药物的开发是一个高技术、高风险、高投入、高回报、知识密集型的系统工程, 涉及化学、药理、制剂、临床医学、毒理等多学科领域。（1个创新药物需 10～12年，耗资2～3亿美元；但年销售额可达百亿美元） 创新药物与活性化合物是两码事（体内药效、毒性、临床疗效、制剂、吸收、分布、代谢、排泄、原料、成本、市场）。 要注重知识产权的保护（活性部位或活性单体）。 选择适当的活性测试方法 天然活性化合物的追踪分离能否取得成功，关键在于有无好的生物活性测试体系。试验模型可以有整体动物、器官、组织、细胞、酶或受体以及体内生物活性物质等。近来并已开始注意在基因调控水平上建立起新的筛选体系。 （1）动物模型 优点：采用整体动物进行的试验与人比较相近。 缺点：实验费时费钱，现象复杂，而且动物个体差异以及病理模型难于建立。 用动物模型作为指导分离过程的活性筛选方法不太适宜。 （2）体外模型 优点：灵敏、简便、可用于微量样品的测试。利用对酶、受体或体内生物活性物质的抑制或促进作用，以及利用基因调控影响进行的活性测试方法简便易行、可定量。 缺点：有时体外活性测试方法所得结果与药物实际在体内的作用并不平行。 体外活性测试方法在实际工作中得到越来越广泛的应用。 3. 确保供试材料具有活性 这是追踪分离活性化合物的前提。为了确保活性成分的分离工作在可靠的基础上进行，对供试天然药物或中药有时须采用多项指标、体内外结合进行测试加以确认。 美国国立癌症研究中心筛选抗肿瘤活性粗提取物的方法: 优点： ① 活性低或含最少的化合物不至于丢失； ② 增加了检出新化合物的机会； ③ 可能分离得到具有不同作用机制的化合物。 4、在众多生物活性中力求找出最本质的作用 天然药物或中药在临床治疗上可能作用于多个靶点，因而具有多种疗效，即表现出多方面的活性。研究者应当力求找出其中最本质的作用，选择建立反映临床治疗作用特点、且效果与之平行的活性测试体系，才有可能追踪分离出目的活性成分或甚至有效成分。 5、注意正确比较并判断各个组分的活性 分离过程中总是按“等剂量不等强度原则”对每一阶段得到的组分（子体）进行活性定量评估，并与母体作比较，追踪活性最强组分。 如果与母体比较，所得几个子体活性强弱参差不齐，则示活性分离与物质分离平行，预示可能得到良好的分离效果； 如果某个子体活性显著增强，则示分离过程中可能除去了某种拮抗作用物质。 具有良好的物质分离与活性分离。 如果所得各个子体活性均见明显减弱，则提示活性成分可能分解、流散、或因吸附剂发生不可逆吸附所致，或因该药物的活性原本为多组分的综合作用，故分离后反而导致活性的减弱或丧失。