实验室生物安全通用要求(2改).pptVIP

1、试验材料： （1）二苯甲酰胺荧光染料（ Hoechst 33258 ）浓缩液 （2）二苯甲酰胺荧光染料工作液 （3）固定液：[乙酸︰甲醇（1︰3）混合溶液] （4） 封片液 （5）培养基及指示细胞 2、试验步骤： 供试品 加入 指示细胞培养板（培养3~5天） 用含盖玻片的6孔培养板培养末次传代细胞（培养3~5天） 至少传代1次 吸出培养液 固定（反复固定两次） 染色 吸出固定液 洗涤（洗3次） 封片（将盖玻片上有细胞的一面向下盖在载玻片上） 观察（荧光显微镜） 注意：同时做阴性和阳性对照 结果判定：阴性对照—无生长 阳性对照—生长 供试品—阴性—合格 供试品—阳性—重试—阳性—不合格 前提必须成立 试验材料：稀释液（PBS）、攻击毒株CVS、参考疫苗、 试验步骤： 不同稀释度的供试品及参考疫苗 16只小鼠，每只小鼠腹腔注射0.5ml，间隔1周再免疫1次 分别免疫注射 用经预先测定的含5～100LD50的病毒量进行脑内攻击，每只0.03ml； 免疫后14天 将攻击毒稀释成100、10-1、10-2和10-3进行毒力滴定，每个稀释度均不少于8只小鼠，每只0.03ml。 同时试验 逐日观察14天，并记录死亡情况，统计第5天后死亡和呈典型狂犬病脑症状的小鼠 P × ×D 计算相对效力： P为供试品效价,IU/ml； T为供试品ED50 的倒数； dT 为供试品的1次人用剂量，ml； dS 为参考疫苗的1次人用剂量，ml； D 为参考疫苗的效价，IU/ml。 7.2.1 实验室管理层应对所有员工、来访者、合同方、社区和环境的安全负责。 7.2.2 应制定明确的准入政策并主动告知所有员工、来访者、合同方可能面临的风险。 7.2.3 应尊重员工的个人权利和隐私。 7.2.4 应为员工提供持续培训及继续教育的机会，保证员工可以胜任所分配的工作。 7.2.5 应为员工提供必要的免疫计划、定期的健康检查和医疗保障。 7.2.6 应保证实验室设施、设备、个体防护装备、材料等符合国家有关的安全要求，并定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。 7.2.7 应为员工提供符合要求的适用防护用品和器材。 7.2.8 应为员工提供符合要求的适用实验物品和器材。 7.2.9 应保证员工不疲劳工作和不从事风险不可控制的或国家禁止的工作。 7.2 管理责任 7.3.1 应充分认识和理解所从事工作的风险。 7.3.2 应自觉遵守实验室的管理规定和要求。 7.3.3 在身体状态许可的情况下，应接受实验室的免疫计划和其他的健康管理规定。 7.3.4 应按规定正确使用设施、设备和个体防护装备。 7.3.5 应主动报告可能不适于从事特定任务的个人状态。 7.3.6 不应因人事、经济等任何压力而违反管理规定。 7.3.7 有责任和义务避免因个人原因造成生物安全事件或事故。 7.3.8 如果怀疑个人受到感染，应立即报告。 7.3.9 应主动识别任何危险和不符合规定的工作，并立即报告。 7.3 个人责任 7.4.1 实验室安全管理的方 擦擦针和目标 7.4.2 安全管理手册 7.4.3 程序文件 7.4.4 说明及操作规程 7.4.5 安全手册 7.4.6 记录 7.4.7 标识系统 7.4　安全管理体系文件 编制原则：简明、易懂、易读 作用：在需要时使员工得到最快速的安全方面的指导。 设置原则：安全、醒目、便利、协调 标识系统分类：警告标识、禁止标识、指令标识和提示标识等四大类型 序号 图 示 意 义 建议场所 1 生物危害 当心感染 门、离心机、安全柜等 2 当心毒物 试剂柜、有毒物品操作处 3 小心腐蚀 试剂室、配液室、洗涤室 4 当心激光 有激光设备或激光仪器的场所，或激光源区域 5 当心气瓶 气瓶放置处 6 当心化学灼伤 存放和使用具有腐蚀性化学物质处 7 当心玻璃危险 存放、使用和处理玻璃器皿处 常用警告标识 7.5.1 实验室应对所有管理体系文件进行控制，制定和维持文件控制程序，确保实验室人员使用现行有效的文件。 7.5.2 应将受控文件备份存档，并规定其保存期限。文件可以用任何适当的媒介保存，不限定为纸张。 7.5.3 应有相应的程序以保证： a)管理体系所有的文件应在发布前经过授权人员的审核与批准； b)动态维持文件清单控制记录，并可以识别现行有效的文件版本及发放情况； c)在相关场所只有现行有效的文件可供使用； d)定期评审文件，需要修订的文件经授权人员审核与批准后及时发布； e)及时撤掉无效或已废止的文件，或可以确保不误用； f)适当标注存留或归档的已废止文