天然产物的提取分离和结构鉴定试卷.pptVIP

凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围，有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的，就会全部被排阻在凝胶颗粒之外，这种情况叫全排阻[1]。两种全排阻的分子即使大小不同，也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙，即使它们的大小有差别，也不会有好的分离效果。因此，一定的分子筛有它一定的使用范围。综上所述，在凝胶色谱中会有三种情况，一是分子很小，能进入分子筛全部的内孔隙；二是分子很大，完全不能进入凝胶的任何内孔隙；三是分子大小适中，能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。大、中、小三类分子彼此间较易分开，但每种凝胶分离范围之外的分子，在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同，但同属于凝胶分离范围内各种分子，在凝胶床中的分布情况是不同的：分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内，而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长。于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床，这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。另外，凝胶本身具有三维网状结构，大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大，小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时，按照分子量大小“排队，凝胶表现分子筛效应。 天然产物中含有多种化学成分，在深入研究之前应首先了解其中有哪些类型的化学成分。利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。由于提取液的颜色通常较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。 斐林试剂是含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。 双缩脲反应氢氧化钠和硫酸铜显紫红色。 氨基酸1种 * 主要有三种：溶剂法、升华法、水蒸气蒸馏法。 溶剂提取法的原理：根据相似者相溶原理，选择与化合物极性相当的溶剂将化合物从植物组织中溶解出来，同时，由于某些化合物的增溶或助溶作用，其极性与溶剂极性相差较大的化合物也可溶解出来。 乙醚——黄酮、内酯、生物碱等；氯仿——游离生物碱等；乙酸乙酯——极性较小的苷类（单糖苷） 正丁醇——极性较大的苷类（二糖和三糖苷） 乙醇、甲醇——生物碱及其盐、有机酸及其盐、苷类、氨基酸、鞣制、苷类、无机盐等 水—— 后续操作：过滤、浓缩。例如： 某种物质的气态和液态共存时的一种状态为临界状态，此时的压力和温度就是临界温度和临界压力。 目前常用的超临界流体有：二氧化碳、氨、乙烯、丙烷、丙烯、水等。 根据各超临界流体的性质，目前最为常用的为二氧化碳，因为它无毒、不易燃易爆，价格相对低廉。 渗(shèn)漉(lù) 煎煮法：操作方法：将粉碎好的样品装入合适容器内，加入适量水，加热煮沸一定时间，并注意不断补充失去的水分，然后倾出提取液，再加入新鲜的水煎煮两次，并可适当缩短煎煮的时间。 浸渍法：操作方法：将样品装入合适的容器，加入适量溶剂，通常以浸过药面为度，浸泡一定时间，并经常搅拌，倾出浸泡液，再加入新鲜溶剂浸泡两次，时间可适当缩短。 渗漉法：将适度粉碎的药材置渗漉筒中，由上部不断添加溶剂，溶剂渗过药材层向下流动过程中浸出药材成分的方法。 渗漉属于动态浸出方法，溶剂利用率高，有效成分浸出完全，可直接收集浸出液。适用于贵重药材、毒性药材及高浓度制剂；也可用于有效成分含量较低的药材提取。但对新鲜的及易膨胀的药材、无组织结构的药材不宜选用。该法常用不同浓度的乙醇或白酒做溶剂，故应防止溶剂的挥发损失。 连续回流提取法：原理：利用溶剂回流和虹吸原理。当烧瓶内的溶剂受热汽化后进入冷凝器，遇冷凝结为液体，回滴到提取器内，起到温浸药材的作用。当提取器内的溶剂超过虹吸管上端时，全部浸泡液则吸入烧瓶中，如此反复多次至提取完全。 优点：溶剂用量少、提取效率高，缺点：耗时长，受热易分解变质的物质不易使用。 通过以上溶剂提取法的讲解，我们看看影响提取效率的因素： 比如茶叶中的咖啡因、牡