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使用空柱子装填,节约时间和成本
使用空柱子装填,节约时间和成本
•物理耐压性能好:近代生物活性大分子纯化填料的一个发展
特点就是高流速、高耐压,作为装填填料的柱子也必须具有耐
压性能好的特点(一般需要〉0.3MPa,3bar ),才能最大限度
的发挥填料性能,节约整个纯化工艺的时间、稳定纯化过程。
•优良的化学抗性:有效的在位清洗(CIP)和消毒(SIP )可以稳
定纯化效果,延长填料的使用寿命,节约成本。清洗一般都要
使用化学试剂或者有机溶剂,所以柱子不但需要生物兼容,并
且需要有优良的化学抗性或者耐有机溶剂。
•大小均匀适合的筛网:柱子的过滤网孔径应该是凝胶颗粒的
1/3, 例如:对于34um,90um填料,柱子筛网10um孔径就够
用,且孔径必须均匀,否则容易造成漏胶,浪费填料。
•操作简便方便装柱:使用调节器( Adaptor ) ,使得保护柱床的
同时更可提高分辨率,节省填料;加上装柱器( packing
reservoir ),可一步把凝胶装满柱子,大大提高柱效,尤其是
凝胶过滤柱
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GE Title or job number /
9/19/2010
XK Column——实验室最受欢迎的中低压层析
柱
•可以耐受大部分的实验室常用化学试剂,不耐受有机
溶剂
•XK16和XK26耐压为0.5Mpa,适合装填大部分填料;柱
子高度20~100cm,不但可以装填离子交换、疏水、亲
和的填料,也特别适合装填凝胶过滤的填料,最大高度
100cm
•筛网网孔尺寸10um
•标配调节器( Adaptor ),提高分辨率
•装柱时配合packing reservoir ,提高装柱效果
•独特的夹套设计,可以循环冷凝水
Tricorn Column——高分辨率的高压层析柱
•耐受有机溶剂
•中高压层析柱,Tricorn 5耐压为10Mpa (
相当于100大气压),Tricorn 10耐压为
5Mpa适合装填大部分填料;特别适合装填
Source系列的填料
•筛网网孔尺寸1um,适合装填粒径较小的
填料
•标配调节器( Adaptor )
•装柱时配合packing reservoir
•高分辨率,高流速的高效层析柱
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GE Title or job number /
9/19/2010
实验室小规模空柱的装柱Tips
• 选择设计优良的层析柱:耐压在0.3Mpa 以上才能在
中低压的层析系统上使用;有adaptor,柱床高度可
以调节,才能保证筛网和柱床之间没有液体,在分
离时,样品均匀的分布在柱床表面,不影响分离效
果
• 装柱前,检查柱子的密封性,包括柱子和装柱器之
间的密封性,防止漏液
• 根据填料的压缩系数(Compression factor,一般
在1.0~1.2之间)和介质浓度(Recommended
slurry concentration,50~70% ),以及装填的高
度,计算所需要的填料。充分沉降填料,取出相应
体积的填料
• 小心的将填料胶液充分混匀;在使用温度下装填层
析柱,装柱缓冲液必须脱气;填料一般都是保存在
20%乙醇中,装柱时,最好用装柱缓冲液将20% 乙
醇置换(source填料除外),进行装柱
• 柱底保留1cm高左右的液体,将胶液匀速的一次倒
入层析柱,必要时使用装
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