酶工程1-5-7酶活力测定--剖析.pptVIP

第五节 酶的活力测定 酶活力（enzyme activity）也称为酶活性，是指酶催化一定化学反应的能力。 酶活力的大小可以用一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度（reaction velocity）来表示，两者呈线性关系。 酶反应速度可用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。 （一）酶活力测定方法 测定要求：快速、简便、准确 测定方法：化学测定法、光学测定法、气体测定法等 测定阶段：（两阶段）反应一段时间 和 测定S或P变化量 测定步骤： 1）选择配制适宜底物溶液； 2）确定反应温度、pH值、底物浓度（＞5Km）、激活剂浓度等条件； 3）酶液和底物混合，反应开始并记录起始时间； 4）反应到一定时间，终止反应（使酶失活或变性），取出适量反应液，测定其中产物或底物的改变量。 （二）酶活力单位 酶活力的大小及酶含量的多少，用酶活力单位数表示，即酶单位（U）。 酶单位的定义是：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需要的酶量。这样酶的含量就可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示（U/g或U/ml）。 1961年国际生物化学和分子生物学联合会规定用“国际单位（IU）”表示酶活力： 在特定条件（25oC,在最适底物浓度、最适缓冲液离子强度和pH值等）下，每1min 催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个国际