彭惠茹-中国农业大学农学院.docVIP

中国农业大学 本科生“URP”立项申请书 项目名称 小麦热诱导启动子的分离和功能验证 申 请 人 彭惠茹 工作单位 农业与生物技术学院 联系电话 010 电子信箱 penghuiru@cau.edu.cn 填表日期 2015年4月8日 中国农业大学教务处制 项目名称 小麦热诱导启动子的分离和功能验证 项目起止时间 2015年4月至2016年4月 项目申请人情况 姓名 彭惠茹 性别 女 出生日期 1968年5月 最后学历与学位 博士后 专业技术职务 教授 从事专业 植物遗传育种 项目概况 近年来，随着全球平均气温日渐升高，高温对植物生长发育的影响日益严重，改良植物耐热性成为植物育种的重要任务。启动子在植物基因表达调控过程中起着十分重要作用。根据其作用方式及功能，启动子主要分为组成型、组织特异型及诱导型三大类。目前基因工程育种中广泛使用的启动子仍然是组成型启动子，其驱动目的基因表达不具有时空特异性，它在所有组织持续而稳定地表达，不仅造成转基因植物体能量浪费，而且还有潜在的安全风险。因此，如何既能使外源基因在高效稳定表达，同时又减少其对转基因植株的不良影响等问题是转基因耐热育种必须解决的一个课题。 本研究以鉴定具有应用前景的小麦热胁迫诱导型启动子为主要目标。通过本项目的实施，可以分离到高效表达的高温诱导型启动子，为小麦基因工程及分子育种服务，同时也为研究耐热基因的表达调控的提供的重要材料。 二、实施计划及方案(明确各个环节对培养学生创新能力的具体思路及考核办法) 1、实施计划：以耐热的小麦品种为材料，克隆2个实验室前期已验证的热诱导基因TaHSP16.9和TaMBF1c的启动子，分析其关键顺式元件序列和功能，构建了启动子驱动报告基因LUC表达的载体转化小麦，明确其在转基因小麦中受逆境特异性诱导表达的特性及在小麦转基因育种中的应用价值。 2、方案: 1）启动子克隆及顺式作用元件分析：获取热诱导基因TaHSP16.9和TaMBF1c的启动子序列，利用生物信息学的手段对启动子区域的顺式作用元件进行分析，预测可能存在的逆境胁迫和激素信号响应元件。锻炼学生对基因序列的搜索和分析能力，学习克隆基因和启动子的方法和手段；2）启动子驱动报告基因GUS或LUC表达载体的构建：学习酶切、连接、载体构建等分子生物学技术和方法，并应用到具体研究中；3）小麦转基因及及分子鉴定：了解小麦转基因的流程，学习转基因阳性苗的分子鉴定方法；4）不同时期和部位及高温逆境下LUC表达分析：学习GUS染色技术和LUC荧光分析技术，使学生掌握相关的知识； 3、考核办法：1）提交一份相关研究的文献综述，参加研究小组学术讨论会。2）提交启动子序列，载体，转基因材料及GUS染色图片等实验数据及结果。3）完成URP工作总结撰写。 三、项目实施的基础和条件 1、TaHSP16.9和TaMBF1均是高温胁迫后剧烈上调表达的基因。 2、已经获得了TaHSP16.9的启动子驱动的GUS报告基因转基因株系； 3、实验室拥有良好的平台支持组织染色和显微镜观察。 四、学生提交的成果 1、克隆2个热诱导的启动子； 2、热诱导启动子的转基因功能鉴定及表达特性分析； 3、提交相关研究文献综述及文献阅读报告； 4、分析结果，提交URP研究论文，参加答辩。 五、经费预算 2000元，主要用于启动子克隆及转基因相关的试剂。 六、学院URP领导小组意见 签字 （盖章） 月 日 3