哺乳动物卵母细胞去核方法的研究进展.pdfVIP

32 安徽农学通报，Anhui A ．Sci．Bul1．2007，13(21) PSTL动物卵母细胞去核方法的研究进展 翁 凡 郑小亮 刘 哲 (黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江大庆 163319) 摘 要：随着“多莉”羊的诞生，体细胞克隆技术近年来发展迅速，并获得了一大批克隆动物。但克隆动物的效率仍然 偏低，这与克隆技术各个环节的完善程度有关，卵母细胞的去核就是其中的重要环节之一。本文对近年来常见的几 种卵母细胞去核方法作了详尽的论述，以期为该领域的科研工作者提供参考。 关键词：体细胞克隆；效率；卵母细胞去核 中图分类号 Q93．3 文献标识码 A 文章编号 1007—7731(2007)21—32—02 Devdopment of Oocyte Enudeation Methods in Mammal Weng Fan Zheng XiaoHang Liu Zhe (Sience and Technology School，Hlj August First Land Reclamation University。 Daqing 163319) Abstract：With the birth of Dolly sheep，the technology of somatic cell nuclear transfer is developing fast and many cloned animals are achieved recendy．The efficiency of clone is still low，depending on the maturity of different parts of this technob ogy in which oocyte enucleation is an important part．This article detailed some oocyte enucleation methods by many labs in recent years intending to give researchers reference in this domain． Key words：somatic cell nuclear transfer；efficiency；oocyte enucle~ion 苏格兰罗斯林研究所于1997年2月报道利用体细胞 均操作繁琐、耗时长，难以达到满意的效果 ]。小鼠核移 成功克隆了绵羊“多莉”，这是世界第一例成体细胞核移 植最早采用盲吸去核法，但因小鼠卵母细胞抗机械损伤能 植出生的哺乳动物，是人类在该领域研究中的重大突破。 力差，去核后卵母细胞成话率低，目前已被“火奴鲁鲁法” 随后的短短几年间多种哺乳动物相继被成功克隆，如鼠 (Wakayama etal，1998)取代，该法借助Piezo系统，去核率 (Wakayama et al。1998)、牛(Kato et al，1998)、猪(Polejae— 高达99％且成活率也达95％，这种方法对那些抗损伤能 va et al。1999)、兔(Chesne et al，2002)等” 。这项技术 力差的动物卵母细胞不失为一种有效的替代盲吸法的机 的出现为发育生物学、医学、制药工程等领域的研究提供 械去核法，但该法设备昂贵，不利于推广…；2005年。白照 了全新的手段。虽然体细胞核移植技术近年来不断优化， 岱等借助透明带膨胀(ZPD)盲吸去小鼠卵细胞核，有效的 但克隆动物的总效率仍然偏低，这与该技术的各技术环节 降低了对卵母细胞的机械刺激，同时减少了操作时间和提 有关。卵母细胞核物质的去除是其环节之一，去核不完全 高了卵母细胞去核后的成活率，该法对透明带薄又缺少弹 将导致重构胚的染色体倍性异常，进而导致胚胎发育异 性的卵母细胞较适用，对其它类型卵母细胞是否适用还有 常。此外去核过程还会给卵母细胞带来不同程度的